Runx3诱导肢芽干细胞分化为软骨细胞研究.pdfVIP

中华中医药学会骨伤分会第四届第二次学术大会论文汇编 第三部分 会议交流论文汇编 ·基础研究篇· Runx3诱导肢芽干细胞分化为软骨细胞的研究· 王拥军h HichamDrissi3 2～，董玉峰3，RegisJ．0’Keefe3， l上海中医药大学脊柱病研究所，上海，中国， 200032 2上海中医药大学附属龙华医院，上海，中国， 200032 3美国罗切斯特大学医学中心骨科学系，纽约，美国，14642 中文摘要 目的：研究Runx3／AML2／cbfa3对不同阶段胚胎肢芽干细胞在骨骼形成过程中的作用。 方法：在体外应用免疫组化、实时定量RT—PCR和Western blot技术分别检测TGF-B和B肝一2干预 和不干预的小鼠胚胎肢芽干细胞，观察Runx3的表达情况。应用逆转录转染技术在间充质干细胞祖 细胞超表达Runx3，进而观察其对不同时期软骨细胞标记物的影响。 结果：在软骨细胞成熟过程中Runx3的两个亚型呈两阶段表达，MASDS亚型在早期软骨细胞分化中高 表达，而MRIPV亚型在肥大软骨细胞时期亦有高表达。总之，在肢芽干细胞成熟过程中，Runx3一直 的表达，但其在软骨形成早期阶段可诱导SOX9的表达。病毒介导的Runx3在小鼠胚胎间充质干细胞 的超表达即可有效诱导早期软骨细胞分化标记物ALP的表达，后期也可诱导肥大型软骨细胞标记物 colX和osteocalcin的产生，这一作用与Runx2相似。 结论：结果显示Runx3在软骨形成及软骨细胞成熟的一系列过程中具有持续的直接的作用。 关键词：Runx3／AML2／cbfa3；转录；骨骼；软骨细胞；免疫组化；逆转录病毒；定量RT-PCR Induces inMouseLimbBudCells Runx3|妣}Q娃8．3Chondrogenesis 3 Drissi Yong—JunWan91·23：Yu-FengDon93：RegisJ．0’Keefe3：Hicham of of l Institute UniversityTCM。Shanghai，China，200032 Spine，Shanghai 2 affiliatedto of Longhuahospital ShanghaiUniversity 3 of ofRochester，NY，USA14642 DepartmentOrthopeadics，University 重点项目(04JCl4070)，上海市国际合作重点项目。 87 中华中医药学会骨伤分会第四届第二次学术大会论文汇编 ABSTRACT are inlimbbudeellcondensationsthat Introduction：Runx3／AML2／Cbfa3expressed undergo murine effect both andbonedifferentiation cartilage during skeletalformatio