PRKAG3基因在绵羊中单核苷酸多态性研究.pdfVIP

PRKAG3基因在绵羊中的单核苷酸多态性研究★ 卢亚洲1，马月辉P。，赵倩君1，凌英会1，娥椰L2，王宝阊3 (1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193；2云南农业大学动物科学技术学院昆明650201： 3西藏农牧科学院畜牧兽医研究所，拉萨，850009) 摘要：PRKAG3基因是编码—磷酸腺苷激活蛋白激酶(A加№硝’，a剐proteinkinase，AMPK)y亚基的 怕基因，主要在骨骼肌中表达．PRKAG3的突变被广泛认为是影响猪肉糖原含量近而影响肉质性状的一 个重要因素．本实验利用ssCP技术在滩羊、哈萨克羊、呼伦贝尔羊和无角道赛特羊PRKAG3基因中检测 到6个SNPs，外显子4上的3个突变为同义突变，1个突变位于内合干ll上，2个突变位于内含子12上．外显 l和内含子12上的3个阶聃存在遗 子4上的3个外iP积存在于滩羊和呼伦贝尔羊中且为稀有突变；内含子l 传连不平衡． 关键词：绵羊；PRKAG3基因；SSCP · 。一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AM：阻lctiya刚proteinkinase，AMPK)是一种异源三聚体酶，在从酵母菌到 哺乳动物进化中具有高度保守性，是激酶复合物的重要组分。柚仰l在真核生物中扮演着“能量调节器” 角色，在调节能量平衡过程中起了关键的作用。AMPK由催化亚基a(cxl 02)和调节亚基p(Dlp2)和丫 (Tl伫丫3)组成，因I必．MPK酶有12种可能的三聚体形式，不同的细胞中有不同的亚型复合物。仉I广泛 分布于全身各组织中，而砣主要分布在骨骼肌、心脏和肝脏中；p1在肝脏高度表达，而p2在骨骼肌中高 度表达：丫l和y2分布较广，而y3只特异性地在骨骼肌中表达。真核细胞在环境或营养变化下导致m胛慷TP 比值升高时，引起‘AMPK级联反应，’开始保存能量并启动ATP合成通路。 PPⅨ．AG3(5乙AMP-activatedkipasesubtmit protein 具有组织表达特异性，主要在骨骼肌中表达，通过编码恤基来调节删的活性进而再调节骨骼肌中塘 原含量。在影响肉质性状方面起着重要作用，近年来在猪肉上被确定为酸肉基因(Rendement napole，R№ 的侯选基因，在牛上也被认为是影响牛肉风味的—个重要基因。因此，对PRKAG3的多态性研究对肉质 性状及风味的研究具有重要意义． 本研究以宁夏滩羊、新疆哈萨克羊、内蒙古呼伦贝尔羊，无角道赛特羊4个品种为实验材料，应用单 strandconformation 链构象多态(single 苷酸多态性检测，以期为绵羊的PRKAG3基因与肉质风味的相关性研究提供基础数据。 l 材料和方法 1．1 试验材料 采集耳缘组织置于75％酒精中，在．20℃冰箱中保存，数据如表l： 表1．试验样品信息 TableI Information ofsaraplc ·基金项目科技部科技资源平台(2005DKA21101) g-fg者．卢亚洲(1982-)，硕士l E-mail：Iuya办ou200l@163．tom ‘·通讯作者；马月辉(1964-)，研究员．旭士生导J|i玩1．el：0J们汹13463；E-mail．-yuehuima@猫3．net 880 第十敞全困南禽遗传杯EⅫ计☆论i％ 1．2引物设计 首先根掘绵羊PRKAG3基田mRNA序列(蹙录号NM001I 22692)_A计引物对PRKAG3扯崮幸序列 进行拶增测序，再根据测序结果设计引物进行PcRm增。引物序列见裘2。 ￡2…‰目“ 引物 弓_物序Ⅻ