Aurora激酶抑制剂载药磁性纳米投递系统的建立与细胞毒性研究.pdfVIP

Aurora 激酶抑制剂载药磁性纳米投递系统的建立及细胞毒性研 究 Aurora kinase inhibitor-loaded magnetic nanoparticles system preparation and research about its anti-tumor activity to the in vitro cell model 1 2 2 2 2 3 2* 谢丽 , 郑明 ，常维维 ，姚娟 ，宋丽娜 ，庞行云 ，吉民 1 2 ( 东南大学生物医学与工程学院，南京 210009 ； 东南大学化学与化工学院，南京 210009) 摘要：丝氨酸/苏氨酸 Aurora 激酶家族（包括 Aurora-A, Aurora-B, and Aurora-C）是有 丝分裂的关键调控因子，用于维持基因组的稳定，在有丝分裂进程中起重要的调控作用。在 肿瘤中，aurora 激酶经常发生过量表达。本实验室自行开发了一种高选择性泛极光激酶抑 制剂，VI-007，再先前研究中已充分证明其对肿瘤细胞细胞的毒性，尤其对肝癌细胞 SMMC-7721 和 HepG2 细胞具有良好的抑制作用。 目的：本实验室通过将 VI-007 与超顺磁性 Fe3O4@OA 纳米粒子结合，开发了一种载药纳米粒子的药物投递系统，可以增加药物在细胞 内的富集，提高药物对细胞的杀伤力。并且通过对细胞内活性氧含量的检测，可以获知此载 药系统可以很大程度上增加细胞内活性氧 ROS的产生，而 ROS 可以引发细胞损伤，增强对细 胞杀伤力。方法：载药纳米粒子的药物投递系统通过溶剂分散法制得，制得的药物投递系统 中药物的浓度及铁的浓度都是通过紫外分光光度计检测。细胞毒性测试通过 cck-8试剂盒检 测，细胞透射电镜观察铁在细胞中的富集部位。普鲁士蓝染观察铁在细胞中的富集，从而间 接推测药物在细胞中的含量。活性氧含量的检测都是通过流式细胞仪进行检测。结果：制作 载药投递系统之前和之后的药物含量检测显示药物载药量超过 90%，材料电镜图显示磁性纳 米粒子表面包裹成功。细胞毒性检测显示，和单纯药物及单纯纳米粒子相比，载药纳米投递 系统可以显著增加对细胞的杀伤力，尤其是药物浓度比较高时。普鲁士蓝染显示载药纳米投 递系统处理的细胞组细胞数量受到明显抑制，相比阴性及单纯药物和纳米粒子的组别，形态 变大并且更加不规则，细胞内铁含量也明显增多。间接显示，进入细胞的药物量增多。流式 细胞仪检测结果显示，载药纳米投递系统可以大幅度增加细胞活性氧的产生。讨论：溶剂分 散法是一种相对简单的药物包裹方法，VI-007 溶解性好，具有很好的载封率。可以明显增 强药物对细胞的杀伤力。增加药物在细胞中的富集。大大提高细胞内活性氧的产生。 ABSTRACT ：The Aurora family of serine/threonine kinases(Aurora-A, Aurora-B, and Aurora-C) plays a key role in cells orderly progression through mitosis. Elevated expression levels of Aurora kinases have been detected in a variety of tumors. Here,we developed VI-007,a novel and highly selective pan-Aurora kinase inhibitor, which has showed significant inhibition effect to many human cancer cell lines,especially for liver cancer cells SMMC-7721 and HepG2 cells.OBJECTIVE ：We developed a kind of drug-carrier system to coat the VI-007 to the surface of Fe3O4@OA(Oleic acid) nanoparticles and