SOS反应和分枝杆菌耐药相关性的研究.pdfVIP

SOS反应与分枝杆菌耐药相关性的研究 吴雯 梅建 张曦 陈敏* 上海市疾病预防控制中心，上海200336 摘要：对SOS反应在结核耐药产生中的作用进行研究。通过紫外线、利福平和氧氟沙星等基因毒性物质作 用于耻垢分枝杆菌(MSm)，利用real-timePCR比较SOS相关基因在诱导突变株中的表达差异。实验发明， 45s的UV暴露下MSm的存活率为50％，利福平和氧氟沙星的最小抑菌浓度分别是32μg/ml和1g/ml。 在基因损伤后，dnaE2、recA和recX等SOS相关基因表达水平上升。SOS反应存在于耻垢分枝杆菌中，可 能跟分枝杆菌的存活和耐药产生有关。 关键词：耻垢分枝杆菌；基因损伤；耐药；SOS反应 AssociationofSOSInductionandDrugResistanceinMycobacteria WU WenMEIJian ZHANGXiCHEN Min* ShanghaiMunicipalCenterforDiseaseControlandPrevention,Shanghai200336 ABSTRACT:TheaimofthisstudyistofindouttheroleofSOSresponseinthemechanismofdrugresistancein mycobacteria.WehaveexaminedthechangesofSOSassociatedgenesexpressionbyreal-timePCRfollowingUV irradiationandrifampicinorofloxacintreatmentinmycobacteriumsmegmatis.UVirradiationofM.smegmatis for45sresultsin50％ survival.TheMICofrifampicinandofloxacinare32tg/mland1μg/ml,respectively.We identifieddnaE2,recA,andrecXthatareupregulatedinvitrobytheDNAdamagingagents.Theseresultsindicate thatSOSresponseisexistedinM.srnegmatisandmaycontributetothesurvivalandemergenceofdrugresistance inmycobacteria. Keywords:Mycobacteriumsmegmatis；DNAdamage；Drugresistance；SOSresponse MTb生长缓慢，具有高传染性，给TB的科。≯研究带水了4i便和生物安全隐忠。MSm中的转录． 翻译过秫与MTb十分类似‘．对健康人群无致病性，作为快速生长型分枝杆曲，刖MSm作为结核瘸 研究的前期{153|犁，将人人加快研究步伐。冈此，小研究主要以MSm为研究对象，利用UV和抗结核 药利福平(I诤)、氧氟沙星(OF)作为基冈毒性物质，诱导突变，检测SoS棚关基因r∞A、r∞X和 dnaE2的表达，从而进行结核耐约机制的探讨。 1． 材料与方法 1．1．材料与试剂 Middlebrook7H9Brolh，Middlebrook7H10 ADC Agar，MiddIebrook OADC RNA II购白德同 Enrichmcnt系Difco公剐J^：出：RNA提取试剂龠NucleoSpin IU kit购臼 MACHEREY．NAGEL公司，Q-PCR荧光试剂盒SuperscriptpIatinumonc-StepQn·pcr ‘ ‘ hI、，i仃og％公司。。