HGPRT基因突变前后V79细胞电化学行为变化研究的论文.pdfVIP

S03-017 HGPRT 基因突变前后 V79 细胞电化学行为变化研究 1 1 3 1 1 2* 1* 崔继文 ，侯铁军 ，祝丽玲 ，高洪福 ，郭晓玲 ，王景涛 ，武冬梅 1 2 ( 佳木斯大学药学院； 佳木斯大学 基础医学院 佳木斯 154000) 随着社会的发展，环境中诱发基因突变的因素激增，人类长期接触可导致动脉硬化、 [1] 肿瘤、畸形、不孕等严重后果 。对环境致突因素进行评价已成为当务之急。然而，目前常 用的传统致突变试验方法都存在手段繁复，周期长，费用高、误差大等问题。因此研究快速、 灵敏、准确、低成本的新方法已成为亟待解决的问题。哺乳动物细胞 HGPRT 基因突变试验 是国际评价致突因素的重要传统方法之一，它以 V79 细胞为主要模型细胞，通过检测细胞 [2] 中HGPRT 基因的突变确定受试物的致突性 。HGPRT 基因突变会引起相关通路中核苷酸 代谢异常，如果能够实时跟踪检测这种变化，必然可以及时反映 HGPRT 基因突变情况。细 胞电化学方法能够检测细胞内核苷酸代谢中间产物嘌呤碱基的变化，并且以其简单、快速、 灵敏度高、费用低等特点成为单细胞分析的一个重要研究手段。因此，研究 HGPRT 基因突 变前后 V79 细胞电化学行为变化，将为环境致突因素评价新方法的建立提供前期研究基础。 本研究采用细胞电化学技术，以四种嘌呤碱基为生物标记物，对 V79 细胞的电化学行 为进行研究，发现了 V79 细胞出现两个电化学信号。其中信号 Ⅰ为黄嘌呤和鸟嘌呤的混合 峰；信号 Ⅱ为次黄嘌呤与腺嘌呤的混合峰 （见图 1）。以此双信号为检测指标，对基因突变 前后的 V79 细胞进行检测。发现突变后 V79 细胞的两个信号峰都放生了明显增长 （见图 2 ）。 由此可见，基因突变使V79 细胞的嘌呤代谢发生了明显变化，电化学方法可以用于检测嘌 呤碱基的变化，因此电化学法有望成为检测 HGPET 基因突变的新方法。 图 1 4 种标准品与 V79 细胞循环伏安行为 32 图2 HGPRT 基因突变前后 V79 细胞循环伏安行为 基金项目：国家自然科学基金（No.）和黑龙江省自然基金项目（No. D201245 ， B201005 ） * 通讯作者：wudmei67@163.com; wjingtao@ 参考文献 [1] Boxhammer V., et al. Investigation o the mutagenic potential o cold atmospheric plasma at bactericidal dosages. Mutation Research-Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis, 2013, 753(1): 23-28. [2]Catherine BK, et al. Transgenic Chinese hamster V79 cell lines which exhibit variable levels o gptmutagenesis. Environmental and Molecular Mutagenesis, 1990, 16(1): 1-12. 33