茶叶化学指纹图谱技术的研究与其应用.pdfVIP

茶科技与产业发展论坛论文集 茶叶化学指纹图谱技术的研究及其应用 周健，成浩★，王丽鸳，刘栩，叶阳 (中国农业科学院茶叶研究所，国家茶树改良中心，浙江杭州310008) 化学指纹图谱是指某些样本经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够 标示其化学特征的色谱图或光谱图。指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段， 主要用于评价产品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性一和“模糊性为其 显著特点。 目前，化学指纹图谱技术已涉及众多方法，包括薄层扫描(TLCS)、高效液相 衍射法等光谱法。随着各种分析技术与化学计量学方法等的发展，指纹图谱技术更 趋完善…。 化学指纹图谱是一种从整体上研究复杂物质体系的技术工具，已经在环境保 护、石油勘探和食品评价等许多领域中得到广泛应用，也是目前中药现代化研究中 的热点之一。已成为国际公认的控制中药或天然药材质量的最有效手段。化学指纹 图谱技术用一定的提取分离程序获取样本中具有特征性的化学成分的总提取物，再 通过测定这种特征总提取物的色谱、光谱或质谱等，对其化学成分进行共性和特性 分析，达到表征其相对化学组成和结构等化学特征的目的。其分析依据主要来自于 植物中后天的代谢产物，且大多为次生代谢产物，它不仅受到遗传因素的影响，也 对后天环境的依赖性很强。因此，它不仅能够反映植物种属间的差异，也能够反映 出植物材料的产地、采收时间和加工炮制方法等因素对植物内含成分构成的影响他1。 随着茶产业的发展，指纹图谱技术的在茶叶上的重要性日益显现，如茶叶的原 产地、珍稀品种等的识别。近年来，不仅有许多历史传统名茶，而且还有不少地方 新创制的名优茶产品都纷纷申请了原产地保护。同时，在申报原产地保护的过程中， 由于各方利益的不同，对于原产地的划定等问题往往意见不一，争论较多。然而， 不同产地生产的同类茶产品，在其化学组成和品质特征上是否有可以科学界定的差 异，是否能够通过技术手段来明确鉴别不同产地的同类茶产品，这一直是一个没有 茶科技与产业发展论坛论文集 解决的问题。随着指纹技术的发展与应用，使茶叶的原产地、新品种及生产时间的 预测分析成为了可能。同样指纹图谱技术的发展也使茶叶育种过程中实现品种的早 期鉴定成为可能。有研究证实了利用近红外指纹图谱技术可实现对转基因玉米的快 速识别口1，由此可见利用指纹图谱技术实现育种过程中的一些早期鉴定如亲本识别， 质量分析等，这对于缩短茶叶的育种年限具有一定的现实意义。 为了实现对茶叶原产地、品种等茶叶特征属性的识别分析，我们采用了化学指 机等模式识别技术来实现对茶叶的产地、原料品种的识别，以此探索化学指纹图谱 在绿茶产地与原料品种验证判别方面应用的可行性与途径，为指纹图谱技术在茶叶 上的应用提供参考方法与依据。 1茶指纹图谱的采集 在本实验中我们分别采用了茶叶的化学图谱(HPLC图谱)和物理图谱(近红外 光学图谱)作为样本的两种图谱来作为茶叶的指纹图谱来进行其产地、品种等特征 属性的识别。 Ilm滤 提15min，过滤并洗涤滤渣三次，合并滤液，冷却后定容至lOOml：用0．22 别以峰面积相对较大的一个主峰为参照，计算相对保留时间和相对峰面积，按90％ 以上样品共有的峰为样本集共有峰，再以多元信息融合原理将两色谱以串行方式进 行象素级融合(组合系数为1：1)“3，构建HPLC指纹图谱。 近红外图谱采集的过程为：在进行近红外光谱采集前，所有的样品均经过粉碎 浙江林大机械厂生产)粉碎约30s左右，再将磨碎后的粉末过40目筛，准确称取 lOg作为近红外扫描样本。样本近红外光谱采集在IFS Quant2，采集模式为吸收光谱。光谱为64次 外光谱仪上进行，随机软件为Opus 扫描的平均值，扫描区域为10000-3500cm～。数据点的间隔为3．857cm一，近红外 光谱数据点为1946个。采集时室温控制在25℃左右，湿度保持稳定。以采集的近 红外光谱作为近红外指纹图谱。 茶科技与产业发展论坛论文集 2茶指纹图谱的特征分析 我们首先用来自杭州、丽水和新昌三个地区的原料品种为龙井43的5个品种 的3