早期百草枯中毒大鼠的急性肝损伤研究.pdfVIP

·374 · 中华危重病急救医学2014年6月第26卷第6期 ChinCritCareMed，June2014，Vol.26，No.6 ·论著· 早期百草枯中毒大鼠的急性肝损伤研究 郭宏兴 高珂 罗亮 邓庆文 张艳平 罗杰 刘亮明 【摘要】 目的 探讨百草枯中毒大鼠肝细胞凋亡、炎症因子表达情况及其发生机制。方法 按随机数字 表法将40只Wistar大鼠分为对照组（n＝8）与模型组（n＝32）。模型组腹腔注射20%百草枯浓缩液30mg/kg；对 照组则给予等量生理盐水。制模后0.5、1、3、7d分别处死8只大鼠，收集下腔静脉血及肝组织，采用酶联免疫吸 附试验（ELISA）检测血清白细胞介素-1茁（IL-1茁）、肿瘤坏死因子-琢（TNF-琢 ）水平；采用逆转录-聚合酶链反 应（RT-PCR）检测IL-1茁、TNF-琢、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和p53的mRNA表达；采用底物显色法检测3d 时肝组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase-3、-8、-9、-12）的活性；经苏木素-伊红（HE）染色后光镜下 观察肝组织病理学改变。结果 模型组肝组织出现碎片状坏死、毛细血管扩张、炎性细胞广泛浸润等现象，且随 时间延长明显加重。模型组0.5d时血清IL-1茁、TNF-琢 水平即明显高于对照组〔IL-1茁（ng/L）：220.13±69.74比 P＜0.01和P＜0.05〕，分别于3d、1d时达高峰〔IL-1茁 ： 0.14±0.03，TNF-琢（ng/L）：102.66±26.43比0.16±0.02， （423.72±153.11）ng/L，TNF-琢 ：（690.35±229.64）ng/L〕，随后均逐渐降低，7d时仍明显高于对照组〔IL-1茁 ： （357.47±87.28）ng/L，TNF-琢 ：（12.39±5.06）ng/L，均P＜0.05〕。模型组肝组织IL-1茁、TNF-琢 和iNOS的mRNA 表达均较对照组明显升高，其峰值分别出现在1d、1d、3d时〔IL-1茁 mRNA（灰度值）：1.569±0.057比0.123± 0.016，TNF-琢 mRNA（灰度值）：0.683±0.077比0.261±0.025，iNOSmRNA（灰度值）：3.259±0.135比0.002± P＜0.05或P＜0.01〕。模型组早期p53mRNA表达与对照组无差异，均为低表达，染毒7d时p53mRNA表达 0.001， 显著增高（灰度值：2.959±0.086比0.263±0.032，P＜0.01）。模型组3d时肝组织caspase活性（pmol/mg）显著高 于对照组（caspase-3：857.25±309.26比169.73±48.21，caspase-8：199.18±61.41比32.26±11.09，caspase-9： 321.62±80.73比90.38±29.76，caspase-12：413.13±89.77比26.73±9.86，均P＜0.01）。结论 百草枯中毒可 导致大鼠发生急性肝损伤，caspase-3、-8、-9、-12活性显著增强；肝损伤的发生与TNF-琢、iNOS和p53基因早 期高表达有密切关系。 【关键词】 中毒，百草枯； 急性肝损伤； 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶； 诱导型一氧化氮合酶； 炎症因子 Early acute liver injury in paraquat poisoning rats Guo Hongxing* ，Gao Ke ，Luo Liang ，Deng Qingwen ， Zhang Yanping ，Luo Jie ，Liu Liangming. *Department of Gastroenterology ，the Fifth Affiliated Hospital of Southern Medical University ，Conghua 510900 ，Guangdong ，China Corresponding author ：Guo Hongxing ，Email ：hongxingg@ 【Abstract 】 Objective Toobservehepatocellularapoptosisandinflammatorycytokinesexpressionandtheir mechanismsafterparaquatpoisoninginrat.Methods