DNA重组技术的工具(公开课).pptVIP

* 陆丰龙山中学 基因工程概念 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的讲就是按照人们的意愿，把一种基因提取出来，加以修饰改造，通过体外DNA重组和转基因等技术，转入另一生物细胞内，定向的改造生物的遗传性状。 陆丰龙山中学 抗虫棉的培育 苏云金杆菌 毒蛋白 杀死害虫 毒蛋白基因 棉花植株细胞内 陆丰龙山中学 陆丰龙山中学 1.1 DNA重组技术的基本工具 基本工具： （1）限制性核酸内切酶——“分子手术刀” （2）DNA连接酶——“分子缝合针” （3）基因进入受体细胞的载体——“分子 运输车” 陆丰龙山中学 特点：一种限制酶只能识别DNA的特定核苷酸序列，并在特定位点切割DNA。 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 陆丰龙山中学 限制酶 陆丰龙山中学 限制酶到底切的是什么呢？ 磷酸二酯键 陆丰龙山中学 两种不同生物的DNA，用同种限制酶切割，那么会出现什么现象呢？ 出现相同的黏性末端 G A A T T CC T T A A G G A A T T CC T T A A G G C T T A A G G A A T T C G G C T T A A G G A A T T C G EcoRI切割位点 黏性末端 黏性末端 陆丰龙山中学 G C T T A A G G A A T T C G G C T T A A G G A A T T C G 不同生物的DNA片段会不会结合呢？ 这两个缺口如何“缝合”呢？ 陆丰龙山中学 2、DNA连接酶－“分子缝合针” DNA连接酶连接什么呢？？ 将两个DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 陆丰龙山中学 陆丰龙山中学 磷酸二酯键 DNA连接酶 A G T A C A A A T G C G A C G G T T A T T A DNA聚合酶 陆丰龙山中学 A G T A C A A A T G C G C G G T T A T T A T DNA聚合酶 陆丰龙山中学 A G T A C A A A T G G C G G T T A T T A T C DNA聚合酶 陆丰龙山中学 A G T A C A A A T G G C G G T T A T T A T C DNA DNA聚合酶 具有连接单链DNA的本领 陆丰龙山中学 相同点 区别2 区别1 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 2)以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链 2)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板 陆丰龙山中学 陆丰龙山中学 DNA连接酶的种类 E.coliDNA连接酶:黏性末端 T4DNA连接酶:黏性末端和平末端 基因进入受体细胞的载体－“分子运输车” 基因工程的载体种类： 质粒 λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 作为基因工程的载体需要怎样的条件呢？ 陆丰龙山中学 将外源基因送入受体细胞。 载体的作用：