线粒体脑肌病临床病理及部分基因突变研究.pdfVIP

第 3l卷第 12期 河 北 医 科 大 学 学 报 Vo1．31 No．12 · 1414 · 2010年 12月 JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERSITY Dec． 2010 · 论 著 · 线粒体脑肌病临床病理及部分基因突变研究 宋学琴，吴红然，李爱华，孔 勇，房娉平，吴东霞 (河北医科大学第二医院神经内科 ，河北 石家庄0500oo) 【摘要】 目的 探讨线粒体脑肌病患者骨骼肌组织病理特点及线粒体 DNA(mitochondfialDNA，mtDNA)在 3243、8344和8993位点的点突变，为疾病的诊断和鉴别诊断提供依据。方法 取8例患者及 lO例对照者骨髂肌活 检标本速冻后切片，常规和酶组化学染色，光镜下观察其病理特点，并提取骨骼肌中的总DNA ，以相应的引物行 PCR扩增，分别应用 BglI、ApaI、SmaI和MspI酶酶切后 ，琼脂糖电泳判定，检测mtDNA中3243、8344和8993位 点是否存在基因突变。结果 8例患者的肌肉病理均存在不整边红纤维；其中2例患者肌肉中mtDNA存在A3243G 点突变，1例存在A8344G点突变，8例患者均未发现T8993G和 T8993C突变。结论 肌肉组织病理学方法和分子 生物学研究可以为线粒体脑肌病的诊断和鉴别诊断提供依据。 【关键词】 线粒体脑肌病；点突变；病理学 doi：10．3969／j．issn．1007-3205．2010．12．004 【中图分类号】 R746 【文献标识码】 A 【文章编号】 1007-3205(2010)12—1414一D4 THESTUDY OFPATHoLoGY AND GENEMUTATlON IN PATIENTSW ITH M IToCHONDRIALENCEPHALOMYOPATHY SONG Xue—qin，WU Hong—ran，LIAi—hua，KONG Yong，FANG Ping—ping，WU Dong—xia (DepartmentofNeurology，theSecondHospitalofHebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050000，China)) ABSTRACT：Objective Toinvestigatethehistopathologicfeaturesofskeletalmuscleandthe pointmutationatnt3243，nt8344 andnt8993ofmitochondrialDNA (mtDNA) inpatientswith mitochondrialencephal0myopathy．Methods Seriallysectionedfrozenskeletalmusclespecimensrfom 8 patientsand10controlswithabatteryofhistochemicalstainswerereviewedunderlightmicroscope．Total DNA wasextracted rfom the muscle specimensand amplified by PCR method using corresponding oligonucleotideprimers．TheDNArfagmentsweredigestedwiththerestrictionenzymeBglI，ApaI，SmaI andMspI，thenthedigestedDNA rfagmentswereanalyzedwithelectrophoresedmethod．Results The histopathologicfindingsofraggedredfibers(RRF)existedinskeletalmusclespecimensrfom8patients． ThemusclemtDNA A3243G pointmutationwasidentifiedi