抗菌肽论文抗菌肽OncorhyncinⅡ的克隆及其在毕赤酵母中的表达纯化及抗菌机制研究.docVIP

抗菌肽论文：抗菌肽OncorhyncinⅡ的克隆及其在毕赤酵母中的表达、纯化及抗菌机制研究 【中文摘要】抗菌肽(Antimicrobial peptide,AMPs)是一类广泛存在于生物体内、在生物遭受外界异物或病原微生物刺激时能快速产生的小分子多肽。研究发现,抗菌肽具有多种生物学活性,它不仅对病原微生物如细菌、真菌、病毒和原虫等具有广谱的杀灭作用,还能抑杀癌变细胞、调节机体免疫等。抗菌肽以其广谱、安全且无耐药等生物学特点,有可能被开发成为一种新型的抗生素来替代传统抗生素在医药、农业和食品等领域应用。本课题的研究对象抗菌肽OncorhyncinⅡ分离自虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)的表皮分泌物中,它是由69个氨基酸残基组成,分子量约为7.2kDa,等电点为12.96,具有较强的稳定性,在微摩尔浓度下便能抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,而且在发挥抗菌活性的同时并未出现溶血作用。本课题研究借助基因工程技术构建生产来源于虹鳟鱼表皮分泌物中的抗菌肽OncorhyncinⅡ的毕赤酵母生产菌株,并将其发酵后进行分离纯化以获得高纯度的多肽,最后初步探究抗菌肽OncorhyncinⅡ的抗菌机制。1毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体及工程菌株的构建采用RT-PCR的方法从虹鳟鱼的表皮中获得抗菌肽OncorhyncinⅡ的cDNA序列,并将其克隆至载体pGEM(