禽类抗HBV抗体IGY检测方法的建立.docVIP

蛋鸡抗HBV-IgY的制备与酶标检测方法的建立 摘要: 目的：制备出特异性的抗HBV-IGY抗体, 探索ELISA检测条件。方法：用人乙肝疫苗免疫蛋鸡, 分别收集鸡蛋, 4 ℃下保存备用; 用鸡蛋抗体IgY提取系统（EGGstract IgY Purification System，EIPS）提取鸡蛋黄中IgY 抗体; 用改进的酶联免疫吸附法检测IgY 抗体含量，探索最佳检测条件。结果在免疫后第一至三周, IgY 抗体含量开始上升，第六周达到高峰，并可持续两个月，结论采用乙肝疫苗免疫母鸡,，可持续性获得特异性抗HBV-IgY抗体。 关键词：乙肝病毒;卵黄抗体；ELISA 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)具有与血清IgG一样的抗体活性。鸡的IgY类似于哺乳动物IgG，其分子量约为180 kb，等电点接近5．2。其重链有4个稳定区，无交链区，而哺乳动物的IgG 只有3个稳定区。IgY的含氮量为14．8％，氨基酸组成及含糖量与人和兔的免疫球蛋白有显著的差异。特异性鸡卵黄抗体IgY对病原体感染的防御无动物种属的差异，这为IgY防治人类疾病的应用奠定了基础。乙型肝炎病毒((Hepatitis B virus,HBV)的感染，不仅引起急、慢性病毒性肝炎，而还与肝硬化和肝细胞癌的发生、发展有密切的关系。接种重组乙肝疫苗或合成肽疫苗能够增强乙肝患者的抗HBV免疫应答，通过接种疫苗对机体施加HBV抗原刺激