碱基错配对短发夹RNA逆转白血病细胞耐药作用的影响.pdfVIP

·736· ·论著· 碱基错配对短发夹RNA逆转白血病细胞 耐药作用的影响 顾玲刘霆龚玉萍 孟文彤 【摘要】 目的探讨碱基错配对短发夹RNA(shRNA)逆转白血病细胞耐药作用的影响。方法 针对mdrl基因mRNA合成一条序列正确的shRNA及正义链少1个碱基的对应错配shRNA，构建一对 抗mdrl shRNA真核表达载体，脂质体介导转染白血病耐药细胞株K562／A02。采用实时荧光定量RT— PCR检测mdrlmRNA表达；柔红霉素泵出实验检测P．gp外排泵功能；M啊法检测细胞对阿霉素的敏 感性。结果序列正确和对应错配shRNA真核表达载体均明显下调mdrlmRNA的表达，降低细胞膜 P-gp外泵功能，60min柔红霉素泵出率分别为6％和10％，显著低于对照组的45％；细胞内柔红霉素 平均荧光强度分别为9．51和7．09，明显高于对照组的2．80；对阿霉素药物敏感性的相对逆转率为 90％和87％。结论正义链碱基错配shRNA对RNA干扰功能无明显影响，与序列正确的shRNA一样 可有效逆转mdrl所致的耐药。 【关键词】 RNA干扰；碱基错配；基因，mdrl；抗药性，多药； E胍ctofIIIi