第六节基因操作工具酶.pptVIP

第一节 基因工程操作中使用的工具酶 第二节 核酸的分离纯化第三节 聚合酶链式反应（PCR）第四节 凝胶电泳系统第五节 核酸的分子杂交第六节 载体系统 第一节 基因操作工具酶 主要内容 1 限制性核酸内切酶 2 DNA连接酶 3 DNA聚合酶 4 修饰酶 1 限制性核酸内切酶 1.2 限制性核酸内切酶的命名 命名原则： 第一个字母（大写, 斜体）： 该酶来源的微生物属名； 第二、第三个字母（小写、斜体）：微生物的种名； 若该微生物有不同的变种和品系，再加上该变种和品系的第一个字母（大写） 若从同一微生物发现多种限制性内切酶，则依照发现和分离的先后顺序用罗马字母表示。 1.3 限制性核酸内切酶的分类 1.3.1 Ⅰ 型限制性内切酶 1.3.2 Ⅱ 型限制性内切酶 1.3.3 Ⅲ 型限制性内切酶 1.3.1 型限制性内切酶 功能：限制、修饰 特点：需Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸为辅助因子；识别位点和切割位点不一致，没有固定切割位点（随机性）； 应用：不常用。 1.3.2 Ⅱ型限制性内切酶 功能：限制、修饰 特点：需Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸为辅助因子；特异切割，切割位点在识别位点外，距识别位点3`端24-26bp处。 应用：数量很少，分子克隆中无实际作用。 1.3.3 Ⅲ型限制性内切酶 功能：识别并特异切割DNA分子。