诺氟沙星-Cu(Ⅱ)-DNA三元络合物光谱研究.pdfVIP

南昌大学学报(理科版) V01．30 第30卷专辑 Suppl of Journal 2006年9月 NanchangUniversity(NaturalScience) Sept．2006 文章编号：1006—0464(2006)专辑一0341一02 钟学智，倪永年+ (南昌大学化学系，江西南昌 330047) 摘 要：诺氟沙星(NFA)是一种具有荧光活性，通过抑制促旋酶成为抗菌谱广的药物。本文采用紫外一可见分光 光度法和固定波长同步荧光光度法(CW—SFS)研究了NFA—Cu“一DNA三元络合物体系，考查了各成分问的相 互作用，并由测量数据计算得到结合常数。研究方法简便快速，背景干扰小。 关键词：诺氟沙星；Cu(II)；小牛胸腺DNA；沟槽结合． 中图分类号：0651 文献标识码：A 喹诺酮类药物是治疗各种感染性疾病的广谱高 效低毒性的化学合成药。研究表明，喹诺酮类抗菌 nm为实验条件，发现DNA的存在可使NFA的荧光 药物与细菌DNA分子间的结合可能受到介质离子 猝灭。进一步研究了温度对二元体系荧光强度的影 强度等因素的影响。近年来，金属配合物与DNA键 响，结果随温度的升高而基本不变，表明NFA与 合的研究正逐渐引起人们的重视。本文采用分光光 DNA之间形成了二元络合物，从而产生了荧光静态 猝灭。 度法和同步荧光光度法研究了NFA—Cu2+一DNA 三元络合物体系，考查了各成分间的相互作用，并计 2．1．2DNA热变性实验将DNA溶液在沸水浴 算得到结合常数。 中加热30min后迅速放人冰水浴中冷却10min，如 l 实验部分 灭较小，是因为热变性能破坏双链(dsDNA)结构中 1．1仪器与试剂 碱基对的有序排列，并导致DNA解旋，但由于saD． NA是以线团状形式存在于溶液中，在线团的表面 Agilent一8453紫外一可见光谱仪，PE—LS55荧 形成了可以与小分子发生氢键作用的许多凹点，所 光分光光度计。小牛胸腺(CT—DNA，北京百秦生 物技术公司)，诺氟沙星(厦门金日制药有限公司， mol／L 浓度范围内对NFA的荧光强度有线性猝灭的作用， 缓冲溶液为0．05 Tris—HCI(pH=7．4)，所用 的试剂均为分析纯，水为二次蒸溜水。 表明它们是通过沟槽作用相互结合。 1．2实验方法 2．2铜(II)对诺氟沙星与DNA结合的作用的影响 在10mL的容量瓶中依次加入一定体积的pH 荧光光谱的影响应用同步荧光法研究了诺氟沙星 =7．4的Tris—HCI缓冲液、诺氟沙星溶液、cu“和 DNA溶液，混匀后测定其相应的紫外光谱和同步荧 金属络合物与DNA的作用。随着DNA的不断的加 光光谱(△入为140nm)。 入，荧光强度不断减小。对于静态猝灭过程，荧光强 度与猝灭剂的关系可以由荧光分子与猝灭剂分子之 2结果与讨论 间的结合常数表达式推导出旧’。设生物大分子B 2．1诺氟沙星与DNA的相互作用 有n个相同且独立的结合点位