三七干预治疗大鼠急性心肌梗死蛋白质组学研究.pdfVIP

V01．30 第30卷专辑 南昌大学学报(理科版) Suppl of 2006年9月 Journal NanchangUniversity(NaturalScience) Sept．2006 文章编号：1006—0464(2006)专辑一1053—02 三七干预治疗大鼠急性心肌梗死的蛋白质组学研究 赵艳峰，叶能胜，张荣利，张会亮，王义明，罗国安 (清华大学生命科学与医学研究院，北京100084) 摘要：建立大鼠心肌梗死模型并用中药三七干预治疗，运用比较蛋白组学的方法分析各组蛋白表达的差异，成功 鉴定7个差异蛋白，HSP27、阿朴脂蛋白A—I、磷酸丙糖异构酶等。通过对蛋白功能进行分析，表明这些蛋白的差 异表达可能在心肌梗死发病及三七治疗过程中起着重要作用有关；同时表明比较蛋白组学的分析方法可以应用于 疾病致病机理及中药药物作用机理的研究。 关键词：急性心肌梗死；三七；蛋白质组学；二维电泳 中图分类号：QsI 文献标识码：A 急性心肌梗死足由于冠状动脉内形成的闭塞使 组织蛋白，采用Bradford方法测定总蛋白浓度，利用 心肌严重而持久性的缺血缺氧，导致心肌细胞坏死、 二维电泳技术进行蛋白分离。凝胶采用银染法和考 凋亡。通过心导管介入将栓子定位植入冠状动脉， 马斯亮蓝法进行蛋白检测。凝胶扫描成像后用 可以建立多种实验动物的心肌梗死模型…，为临床 PDQuest软件进行分析，主要考察凝胶中蛋白质点 研究提供动物模型。传统中药三七对调节心脑血管 的缺失和出现以及多块胶之间蛋白质点的表达丰度 系统有重要的作用心】，如抗心肌缺血、扩血管、降血 变化。在考染凝胶中找出对应的差异蛋白点，经脱 脂、防止动脉粥样硬化等。近年来比较蛋白组学研 色、酶切后，采用MALDI—TOF—MS测得肽质量指 究发展迅速，目前已找到一些与心血管疾病相关的 纹谱(PMF)在数据库中查询识别鉴定蛋白质。 蛋白¨1。本实验建立大鼠心肌梗死模型，考察三七 2结果与讨论 药材干预治疗对急性心肌梗死组织蛋白表达的影 响，为进一步揭示致病机理及中药作用机理奠定基 2．1心肌梗死模型评价 础。 我们通过结扎冠状动脉左前降支建立大鼠急性 心肌梗死模型，阻断冠状动脉血流，造成心肌梗塞， 1 实验部分 形成过程与临床病理生理过程极为相似，可用于药 1．1仪器及试剂 理学、病理生理学以及细胞工程学等各个领域的研 究。 二维电泳仪及PDQuest凝胶分析软件(美国Bio 2．1差异蛋白表达分析 —Rad公司)、Powerlook2100XL凝胶图像扫描仪 (美国UMAX公司)、基质辅助激光解吸电离飞行时 图1给出了三组大鼠心肌组织(正常组A、梗死 间质谱(德国Bruker公司)。三七云南道地药材；固组B、三七药材给药组C)的蛋白表达情况。经过 相pH梯度于胶条(pH5—8，线性梯度，17cm)、两 PDQuest软件分析，在每块胶中检测到不少于800 个蛋白点。其中一部分蛋白的存在与否、含量多少 性电解质溶液、碘乙酰胺等购自Bio—rad公司；二