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中国甘薯育种与产业化,2005,188—194
农杆菌介导的甘薯遗传转化影响因素的研究
李 强1’2 刘庆昌2 马代夫1
(1江苏徐州甘薯研究中心,徐州221121;2中国农业大学农学与生物技术学院,北京100094)
胞进行了遗传转化。结果表明,继代培养3d的胚性悬浮细胞最适合转化;菌液浓度0D。岫=0.1—0.9对遗传转化效率没
有明显影响;用0.45mol/L甘露醇预处理胚性悬浮细胞60rain可以显著提高转化效率;在共培养培养基中添加20
p,mol/L
AgNO,和100AS均可以显著提高转化效率;共培养2—4d,转化效率高,并且转化愈伤组织状态好。利用适宜的转
i上rnol/L
化条件转化徐薯18胚性悬浮细胞,GUS瞬时表达率达90.2%。
关键词:甘薯,徐薯18,胚性悬浮细胞;根癌农杆菌介导
Factors
AffectingAgrobacterium
tumefaciens——mediated
tionof
sweetpotato(Ipomoeabatatas(L.)Lam.)
Li Liu MaDaiful
Qian91·2 Qingchan92
Xuzhou Research 22112 of and
(1 SweetpotatoCenter,Xuzhou
1,Jiangsu;2CollegeAgronomyBioteehnology,
China
Agriculture
University,Beijing100094)
Abstract:The transformationconditionsof
Agrobacteriumtumefaciens—mediated batatas(L.)Lain.,
sweetpotato,咖omoea
werestudied cell culturesof 1
Xushu maincultivarinChina.The
byusingembryogenicsuspension 8,a A.tumefaciens
strainEHAl01 a vector with
harboringbinary pROA93
neomycinphosphotransferase
gene(ⅣPrⅡ)andB—glueuronidase
usedinthe resultsshowedthat cell cultures
gene(GUS)waspresentstudy.The embryogenicsuspensionsubcuhuredfor
3 were forthetransformation.The
days optimal A. concentrationfrom to hadno
t“m电触iem OD600蛳=0.1OD600。m=0.9
on
effectthetransformation,The
for60rainwith
significant pretreatment 0.45mol/Lmannitol
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