AngⅡ诱导血管内皮细胞衰老及凋亡相关基因的表达.pdfVIP

_中垦 堡生理苤查 !seJournalofPathophysiology 2008，24(6)：1041—1046 · l40 l · [文章编号] 1000—4718(2008)06—1401—06 · 论 著 · AnglI诱导血管内皮细胞衰老及 凋亡相关基因的表达 单海燕 ， 白小涓 ， 张四扬 ， 陈香美 (中国医科大学 第一附属医院循环内科，病理教研室，辽宁 沈阳 110001；中国人民解放军总院肾病中心，北京 100853) [摘 要] 目的：探讨血管紧张素 Ⅱ(AngII)诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)衰老及凋亡相关基因Bcl一 2、Bax的表达。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞 ，采用 四甲基偶氮唑蓝比色法测定内皮细胞存活率，用 AngII (10 mol／L)及 valsartan(AngII1型受体特异性拮抗剂)干预，分为实验对照组、AngII诱导组及valsartan组，采用 B 一 半乳糖苷酶染色和流式细胞术鉴定细胞衰老，通过 Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学变化，并利用免疫细 胞化学染色法、RT—PCR法和Westernblotting分析各组细胞凋亡相关基因Bcl一2、BaxmRNA及蛋白的表达水平。 结果：与对照组相比，10 mol／LAngII诱导组存活的细胞数为对照组的(81．90±0．40)％；(80．10±6．81)％的细 胞呈现 p一半乳糖苷酶阳性染色。流式细胞仪检测细胞周期停滞于G。一G。[(91．36±6．45)％]，证实细胞衰老； 荧光显微镜可见明显的细胞凋亡[(31．84±2．86)％]。与AngII诱导组相比，valsartan组 Bcl一2mRNA及蛋白表达 水平明显增高(P0．05)，BaxmRNA及蛋白表达水平降低 (P0．05)。结论：AngII可诱导体外培养的HUVECs 老化。经AngII诱导的衰老HUVECs发生凋亡，提示细胞凋亡参与了AngII诱导HUVECs细胞的衰老过程。AngII 诱导血管内皮细胞衰老的分子机制之一可能与Bcl一2、BaxmRNA及蛋白表达的失衡有关。缬沙坦对血管内皮细 胞衰老有一定保护作用。 [关键词] 血管紧张素 II；脐静脉内皮细胞；血管衰老 ；细胞凋亡；基因，Bcl一2；基因，Bax；蛋 白质，Bcl一2； 蛋白质 ，Bax [中图分类号] R339．38 [文献标识码] A Senescenceofendothelialcellsandgeneexpressionassociatedwith apop- tosisinducedbyangiotensni 11 SHANHai—yan ，BAIXiao—juan，ZHANGSi—yang2，CHENXiang—mel (DepartmentofCiwulatoin，The凡 tAffiliatedHospital，DepartmentofPathology，ChinaMedicalUniverstiy，Shenyang 110001，China；DepartmentofNephroolgy，GeneralHospitalofPeoplesLiberationArmy，Beqing100853，China．E— mail：xjuanbai@yahoo．com．ca) [ABSTRACT] AIM ：Tostudythesenescenceofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)andBcl一2， Baxgeneexpressionassociatedwihtapoptosisinducedbynagi