衰减子基因突变导致临床大肠埃希菌高产AmpC酶研究.pdfVIP

selectiog Zhao the ofantibiotic—resistantmutants：a derivedfrom [3J X，DrlicaK．Restricting generalstrategy studies．CllnInfect nuo…qui．olanas Dis，2001，33(Suppl)：S147一S156． a1．Mutant concentrationof [4]Zhaox，EisnerW，Pod—RzsenthalN．et prevention and aurellS．Antimicrob 284756)for Chanoth— staphylococcus Xse．ts ciproflexacin—susceptibleciprolloxacin—resistant er，2003．47：1023—1027． and K．Themutantselcetionconcentrationantimicrobial Antimicmh [5]Drliea resistance．J Chemother，2003， 52：11一17， [6]崔俊昌，刘又宁，王睿，粱蓓蓓，裴斐．4种氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度 ．中华医学杂志，2004，84(22)：1863—1866． a1．DNA ofthe for [7]Zhao J，et avoid— XL，ChenX，D(删a wpoisememsetargetsfluoroquilonem：astrategy bacterialresistance．ProcNatlSciUSA1997。94：13991—13996． ing 衰减子基因突变导致l临床 大肠埃希菌高产AmpC酶的研究 管希周刘叉宁罗燕萍余丹阳陆思静周光陈良安 (中国人民解放军总医院呼吸科微生科北京100853) [摘要]目的：研究临床分离大肠埃希茵中衰减子基因突变对Ampc基因表达以反对药表型的影响。 方法：用三雏试验、等电聚焦、酶抑制试验以及微量稀释法等进行表型检测。聚合酶链反应(PcR)、基 因测序以及比对等方法对调节基因进行扩增，分析。并把调节基因克隆到pCAT3一basic(无启动子的报告 基因载体)上，用酶联免疫法(直接法)和最小抑茼浓度测定(间接法)等方法对基因表达进行研究。 结果：和标准菌株走肠埃希菌K一12耐基因相比，受试茵的衰减子区出现了4个碱基22C—T，26、 27TA—GT、32G—A的替换。该株茵三维试验阳性，等电聚焦以及酶抑制试验表明该茵株能产三种等电点 克拉维酸抑制。微量稀释法检测表明该菌株不但对多种三代头孢菌素耐药，而且对头孢吡肟对药。但对 接检测表明突变的调节基因能够比敏感茼株调节基因表达CAT蛋白的水平高约10倍左右。结论：大肠埃 希菌衰减子突变能够导致AmpC基因高表达而对多种B一内酰胺类抗生素表现耐药。此类菌株的出现，将 为r陆床抗感染治疗带来新的困难。 [关键词]大肠埃希菌，AmpC(头孢菌素酶)，基因，突变，抗生素，耐药 to of