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泡沫分离技术及其在蛋白分离中的应用.ppt

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泡沫分离技术及其在蛋白分离中的应用 泡沫分离的简介 泡沫分离,又称泡沫吸附分离技术,是一种用来分离金属离子、胶体、分子及沉淀等物质的一种新型分离方法,并在发展过程中逐渐作为一种单元操作加以研究。至今为止,泡沫分离技术不但在矿物浮选的应用上已经相当成熟,并已成功应用于很多表面活性物质(诸如蛋白质、酶、胶体、合成洗涤剂等)的分离。近年来,科学研究者们仍在不断探索更高效、环保、适于工业化操作的泡沫分离操作方式,并不断尝试分离新的活性物质以满足现代社会及工业的需求。继用泡沫分离技术从溶液中回收微量金属离子的相关研究开始之后,随着对整个分离过程的原理、机制、操作方式、分离条件的深入研究,泡沫分离技术的应用范围逐渐扩大到蛋白质、DNA、酶等各种生物活性物质以及合成洗涤剂的分离。其环保、温和、操作简单的特点无疑将使其在有关生物、环境、食品、化工等工业中得到更加广泛的应用。 通过对泡沫分离技术的产生及发展大致可以看出,泡沫分离的应用可以分为两大类。一类是本身为非表面活性物质(如铜、锌、银、镉、铁、汞等金属类物质),需通过配位或其他方法使其具有表面活性,这类体系被广泛地用于工业污水中各种金属离子的分离回收,以及海水中铀、钼、铜等的富集和原子能工业中含放射性元素锶的废水的处理;另一类是本身具有表面活性的物质,或是各种天然/合成表面活性剂的分离,如全细胞、酶、蛋白质、胶体分离及合成洗涤剂等。 下面本文将就泡沫分离技术及其在质分离蛋白质中的应用作一个简单介绍 泡沫分离蛋白质主要是由于蛋白质具有一定的表面活性能够吸附于气液界面,因此知道能够利用泡沫分离技术分离提取的蛋白质首先应具有一定的表面活性,但并非拥有表面活性的蛋白质就能够用泡沫分离法进行分离。目前能够利用泡沫分离技术成功分离出的蛋白质有:磷酸酶、链激酶、蛋白酶、血清白蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶、尿素酶、过氧化氢酶、明胶、大豆蛋白、卢一酪蛋白、抗菌肽类等一系列蛋白质。 蛋白质和酶的分离浓缩 但同是抗菌肽类的蚕抗菌肽,由于其在泡沫分离过程中存在大量的变性失活,因而不适于泡沫分离。这是由于蛋白在气液界面吸附时,一般都伴随着分子构相的改变,如球蛋白在吸附过程中就需要改变构相,暴露出内部的疏水基团,这就是蛋白质的变性。然而有些时候,这种活性的改变是不可逆的,因而限制了该蛋白质的泡沫分离操作。关于哪种蛋白质能够利用泡沫分离技术得到分离富集,目前还没有一定的理论指导,但通过近年的研究总结出两大类蛋白质适于泡沫分离,分别是和质膜结合的蛋白质与抗菌肽类,这两类蛋白质的共同点是都有很强的疏水性,具备了吸附于气液界面的表面活性. 泡沫分离技术的基本原理 泡沫分离是根据吸附的原理,向含表面活性物质的液体中鼓泡,使液体内的表面活性物质聚集在气液界面(气泡的表面)上,在液体主体上方形成泡沫层,将泡沫层和液相主体分开,就可以达到浓缩表面活性物质(在泡沫层)和净化液相主体的目的。被浓缩的物质可以是表面活性物质,也可以是能与表面活性物质相络合的物质,但它们必须具备和某一类型的表面活性物质能够络合或鳌合的能力。人们通常把凡是利用气体在溶液中鼓泡,以达到分离或浓缩目的的这类方法总称为泡沫吸附分离技术,简称泡沫分离技术。 泡沫分离技术的操作方式 分离技术的基本流程:间歇式和连续式 连续式泡沫分离装置与间歇式没有什么本质区别,只是含表面活性剂的料液连续地加入塔内,泡沫液和残液连续地从塔内抽出。 应用连续型泡沫分离装置,便于工业化、自动化生产。 三种不同的连续型泡沫分离装置分别为浓缩塔(精馏塔)、提取塔(提馏塔)、复合塔(全馏塔),可根据不同目的选择不同的塔。 浓缩塔可提高塔顶泡沫液浓度,但影响残液脱除率。 提取塔可提高残液脱除率。 复合塔可提高塔顶泡沫液浓度,且可提高残液脱除率,但被残液带出的表面活性剂多,可在塔底设置环形隔板来弥补。 泡沫分离技术的特点 泡沫分离技术作为一种新型的生物分离方法与传统分离方法相比具有以下优点: (1)该方法适合于对低浓度的产品进行分离,与分离低浓度产品的传统工艺(超临界萃取技术,膜分离技术)相比,泡沫分离法设备简单,便于操作。 (2)分辨率高,该方法是根据被分离物的表面活性的差异进行分离的,对于表面活性差距大的混合液体系,采用该方法进行分离提取便能获得高纯度的富集液。 (3)运行成本低,操作简便。例如对于蛋白质的分离,传统的技术多采用无机盐以及有机溶剂等分离介质,使得运行成本较高,而该分离技术仅仅是一些动力的消耗,因而该方法运行成本低,操作简便。泡沫分离技术在生物化工分离体系特别是蛋白质分离体系中将有很好的应用前景,引起了更多研究者的关注。 泡沫分离的主要缺点是表面活性物质大多是高分子化合物,消化量较大,有时也

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