实时定量RT-PCR法检测咽拭子中麻疹病毒核酸.pdfVIP

中国城 乡企业卫生 2015年 2月第 1期(总第 165期) · 预防医学 · 实时定量RT—PCR法检测咽拭子中麻疹病毒核酸 赵越 ，李壮 ，费飞 1．葫芦岛市疾病预防控制中心环境卫生科，辽宁 葫芦岛 125000；2．葫芦岛市卫生监督所 摘要：目的 应用实时定量RT—PCR方法检测咽拭子中麻疹病毒核酸。方法 荧光定量real—timeRT—PCR方法检测麻疹 病毒核酸；酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测麻疹特异性 IgM抗体。结果 荧光定量RT-PCR方法在咽拭子中检测麻疹 病毒核酸的结果是准确的。结论 荧光定量RT—PCR方法是一种快速、简便检测麻疹病毒核酸的方法，适用于麻疹病毒的 早期诊断。 关键词：实时定量RT—PCR；麻疹病毒；早期诊断 中图分类号：R117 文献标识码：A 文章编号：1003—5052(2015)Ol一044—02 麻疹是 由麻疹病毒引起的一种以发热、呼吸道 2 结 果 卡他样症状和遍及全身斑丘疹为特征的急性病毒性 2．1 41份血清样本 19份麻疹病毒 IgM 阳性，2份 传染病。2005年 WHO西太平洋地区委员会决议提 麻疹病毒 IgM可疑 (可疑的标本 7d后采集血清，检 出，到 2012年消除麻疹I11，中国政府作出了郑重承 测麻疹病毒 IgM为阳性)。 诺。最近几年，我国麻疹疫情有明显回升的趋势。因 2．2 41份咽拭子标本 21份麻疹病毒核酸阳性。 此快速准确的实验室诊断对控制麻疹疫情、消除麻 2．3 血清麻疹病毒标本 IgM阳性标本和咽拭子麻 疹有着极其重要的意义。 疹病毒核酸阳性均为同一个人的标本。 目前确诊麻疹的实验室手段主要采用近年发展 2-4 结果 使用 RT—PCR法检测咽拭子样本 41 起来的荧光定量 RT—PCR法和酶联免疫吸附试验 份，麻疹病毒核酸阳性率 51．2％。使用 ELISA法血清 ELISA法。现将我中心运用上述两种实验室方法进 样本4l份，麻疹病毒 IgM抗体阳性率46．3％。两种 行麻疹病毒检测情况报告如下。 检测方法感染率经统计学处理(x=0．20，P0．05)，差 1 材料与方法 异无统计学意义。检测结果见表 1。 1．1 样品采集 标本选择葫芦岛市 2013年 41例麻 表 1 两种方法检测结果 疹疑似病例。在出疹 3d内采集静脉血2ml和咽拭子 标本。血清标本进行麻疹 lgM抗体检测，咽拭子标本 进行荧光定量 RT—PCR检测。 1．2 检测方法 WS296—2008(麻疹诊断标准》附录A 血清学诊断方法。附录B病原学诊断方法 。 3 讨 论 1．3 所用试剂均在有限期 内使用 RNA提取试剂 近年来麻疹疫情有上升态势，迫切需要一种快 使用的是QIAGEN RneasyMiniKit50试剂盒麻疹 速、准确的实验室检测方法为临床诊治和疫情监测 IgM抗体测定使用德国维润赛润公司生产的麻疹病 提供支持。经过几年来的实践，应用荧光定量 RT— 毒IgM抗体检测试剂盒，实验方法按试剂说明书进行。 PCR技术直接测定麻疹患者咽拭子标本中的麻疹病 麻疹病毒核酸检测试剂盒使用 中山大学达安基 毒核酸，对麻疹疑似病例进行早期诊断，取得了满意 因股份有限公司的麻疹病毒 ／风疹病毒双通道核酸检 的结果。 测试剂盒(PCR一荧光探针法)，实验步骤严格按照说 荧光定量RT—PCR法具有以下优点 ：荧光定量 明书进行。