溶瘤腺病毒的安全性研究进展.pdfVIP

· 56 · 中国癌症防治杂志2015年2月第7卷第1期 ChinJofOncolPreyandTreat，Feb2015，Vo1．7，No．1 誊 蠹 溶瘤腺病毒的安全性研究进展 鲁克庆 王志平 作者单位：730030 兰州 兰州大学第二医院泌尿外科研究所；甘肃省泌尿系统疾病研究重点实验室；甘肃省泌尿系统疾 病临床医学中心 摘【要】溶瘤腺病毒又称条件复制性腺病毒 (conditionallyreplicatingadenovirus，CRAD)，是一种用于肿瘤治疗的生物制 剂，其安全性备受人们的关注，如何系统化评价其毒性是应用于临床的关键步骤。近年来，对于溶瘤腺病毒安全性的报道 越来越多，包括从特异性杀伤肿瘤细胞的细胞实验到动物的毒理实验等。本文对溶瘤腺病毒的细胞实验、荷瘤小鼠治疗的 毒性、动物急性毒性实验及长期毒性实验、生殖毒性实验的研究及其评估方法和 目前临床研究状况进行综述。 【关键词l溶瘤腺病毒；安全性；毒性；评估方法 【中图分类号】R373 【文献标志码 】A 【文章编号】1674．5671(2015)01—04 DoI：10．3969~．issn．1674—5671．2015．01．13 目前，尽管溶瘤腺病毒的体内、体外实验已取得较 显下降。含荧光蛋白的Ad．PSCAEUPII—LUC在荧光显微 好的抗肿瘤效应，但大多数溶瘤腺病毒尚未应用于临 镜下，荧光蛋白LUC在正常的膀胱细胞系 SV—HUC一1中 床。究其原因，主要是由于其安全．1生问题令人担忧。溶瘤 的表达明显低于膀胱肿瘤细胞。另外 ONYX．015能够在 腺病毒作为一种基因工程改造的病毒 ，免疫原性较强， p53基因突变的肿瘤细胞中复制 ，VCN一01能够在 pRB 在宿主体内具有引起超敏反应的可能。除此之外，还有 信号通路缺陷的细胞中复制 2]，这两个基因在肿瘤细 一 些流感样毒性症状包括寒战、发热、乏力 、肌 肉疼痛 胞 中常常突变 ，而在正常细胞 中通常起到选择性作 等，以及许多未知的毒副反应和安全隐患。为此，进行溶 用。这些都说明溶瘤腺病毒在体外实验研究中是 比较 瘤腺病毒的安全性评价非常必要。目前对于溶瘤腺病毒 安全的。 的安全性研究主要是以细胞实验和动物实验为主，临床 2 溶瘤腺病毒的体内实验 试验进展较为缓慢。 溶瘤腺病毒在体 内实验 的安全性评价是其进入临 1 溶瘤腺病毒的体外实验 床实验并应用于临床的关键。国家食品安全性毒理学评 体外的安全性研究是进行安全性评估的第一步，其 价程序规定：食品药品安全性毒理学评价实验主要包括 研究包括将溶瘤腺病毒分别转染肿瘤细胞和正常组织 四个阶段：第一阶段为急性毒性实验 ；第二阶段为遗传 的细胞，实验结果主要依靠给药后细胞计数，电镜下观 毒性实验、传统致畸实验、短期喂养实验；第三阶段为亚 察细胞 内的病毒颗粒 ，检测溶瘤腺病毒对正常细胞和肿 慢性毒性实验——90d喂养实验 、繁殖实验 ；第四阶段 瘤细胞caspase3活性的影响，分析在细胞凋亡中的作用 为慢性毒性实验。目前溶瘤腺病毒体内的安全性评估主 和差异，检测溶瘤腺病毒相关基因在正常细胞和肿瘤细 要包括荷瘤小鼠的治疗和毒性实验、正常小 鼠的急性和 胞中的表达差异，一般使用Westernblot法对表达的病 长期毒性实验、生殖毒性和发育毒性实验。其结果的评 毒蛋白进行检测 ，RT．PCR技术检测病毒稳定性和转染 估主要集中于溶瘤腺病毒对动物一般行为的观察、体重 效率。通过这些方法基本上可以确定病毒在正常细胞和 变化、血液学的变化和各个组织器