-60%27-Coγ射线诱变选育聚谷氨酸高产菌株地研究.pdfVIP

60Co γ射线诱变选育聚谷氨酸高产菌株 索 晨 梅乐和*1 姚善泾 （浙江大学化学工程与生物工程学系，杭州 310027 ） 60 摘 要 以地衣芽孢杆菌CICC10099 为出发菌株，利用 Co γ射线进行诱变，以期提高菌株产聚谷氨酸的 能力。在60Co γ射线诱变剂量梯度下，考察了不同剂量下的致死率和正突变率，确定了较佳的辐射诱变剂 量，并以此辐射剂量对出发菌株进行诱变，获得产量较高的菌株，在此基础上对突变株的遗传稳定性进行 一些研究。结果表明，诱变剂量200Gy 时，致死率大于90%，正突变率高达13.3%，为适宜的诱变剂量。 经过初筛、复筛和遗传稳定性分析，获得了一株高产的突变株，与出发菌株CICC10099 相比，产量从9.8g/L 提高到16.9g/L，提高率72.4% 。 关键词 地衣芽孢杆菌 60Co γ射线 γ聚谷氨酸诱变育种 Selection of Poly- ( γ-glutamic acid) High-yield Strain 60 by Co γ-irradiation and medium optimization SUO Chen, MEI Lehe and YAO Shanjing (Dept of Chemical and Biochemical Engineering ，Zhejiang University ，Hangzhou 310027) Abstract 60Co γ-ray was used to irradiate Bacillus licheniformis CICC10099 for screening the mutant strain of γ -poly(glutamic acid) ( γ-PGA) high-yield. And the effects of mutation induction were determined and analyzed. A mutant strain Bacillus licheniformis S16 with high level of γ-PGA was selected. Compared mutant strain S16 with the original strain CICC10099, the yield of γ-PGA was increased from 9.8g/L to 16.9g/L,and the increase rate was 72.4%. Keywords Bacillus licheniformis, 60Co γ-irradiation, poly-( γ-glutamic acid), mutation breeding 引 言 聚谷氨酸(简称γ-PGA)是由L-谷氨酸和(或)D-谷氨酸通过α-氨基和γ-羧酸间的酰胺键 连接而成的氨基酸聚合物，相对分子质量一般在 10 万~200 万[1,2]。由于γ-PGA 具有极强 的水溶性、良好的生物相容性、可生物降解等性质，是一种对人和环境都无毒性的生物高分 子，在食品、化妆品、医药、水处理等诸多领域有重要的应用和潜在的应用价值，近些年来 一直受到人们的重视。γ-PGA 及其衍生物已经作为增稠剂、润滑剂、止痛剂、防冻剂、蓄 水保水剂、医药载体、生物黏合剂、可降解生物纤维、高吸水性水凝胶、生物高分子凝聚剂、 重金属吸收剂和动物食物添加剂等在诸多领域获得了广泛的应用[1,2,3]。 一般γ-PGA 可以通过多种微生物的生物合成来制备，已经有很多相关的报道，但总体 来看γ-PGA 的生产菌产量一般还比较低，已经阻碍了γ-PGA 的制备和应用。针对这一问 题，本文将以地衣芽孢杆菌CICC10099 为出发菌株，利用60Co γ射线对其进行诱变，以期 获得遗传稳定性良好的高产突变株，进而提高菌株生产γ-PGA 的能力，为进一步开展相关 研究打下良好的基础。 1 材料和方法 联系人：梅乐和，基金项目:教育部留学回国人员基金、浙江省科技攻关项目、浙江省留学回国人员基金 Corresponding author: Prof. MEI Lehe. E-mail: meilh@che.