BYDV-GPV和GAV混合侵染蚜传专化性研究.pdfVIP

病毒及病毒病害 BYDV—GPV与GAV混合侵染蚜传专化性研究4 onthe of Transmission StudiesSpecificityAphid Following GPVand ofBYDV DoubleInfection GAV by 刘艳，王锡锋，周广和 00094) (中国农业科学院植物保护研究所，北京1 小麦黄矮病是麦类作物生产上的重要病害之一。从大量麦类种质资源中来筛选到抗性 材料，基因工程育种是培育抗病品种的手段之一。病毒的外壳蛋白(CP)基因介导的抗病 dwa矿 性在抗病毒基因工程育种中应用广泛，我国也己获得抗大麦黄矮病毒(Barleyyellow 系间混合侵染的蚜传专化性与分子变异进行探索，旨在为大麦黄矮病毒抗cP基因工程的生 态安全性评价体系建立一种可能的模式。 以我国麦区的大麦黄矮病毒流行株系GAV、GPV为材料，利用它们的蚜传特异性，将由 aveDaeF．， Ma)传播的GAV混合侵染到岸黑燕麦上，观察发病情况。对混合侵染的病株再用禾谷缢管蚜 和麦长管蚜继代传毒，系统观察介体专化性的变异。通常情况下BYDV-GAV株系由麦长管蚜 传播，禾谷缢管蚜不能传播；而GPV株系可由禾谷缢管蚜，但麦长管蚜不能传播。蚜传实 验结果表明在获得的93株独立的混合侵染蚜传体系中16株在继代传毒中发生了蚜传特异 性改变，占总数的17．2％。其余77株混合侵染后代没有发生蚜传特异性改变，且均只能由 麦长管蚜多代传毒。蚜传表现型的变化说明可能存在异源包装现象，且表现型混合发生的 比例较高。 用DAS—ELISA法对混合侵染后代进行了测定，结果表明：69个混合侵染后代均与美国 的MAV抗血清有强烈的特异性反应，初步判定无论麦长管蚜传毒株还是禾谷缢管蚜传毒株， 均传播的是GAV。进一步证明了存在异源包装现象。 根据己报道的大麦黄矮病毒GAV、GPV和PAV的外壳蛋白基因序列、通读蛋白(RTP) 基因序列设计了6对特异性引物，分别以提取的大麦黄矮病毒GAV、GPV和PAV三种株系毒 源的总RNA为模板，反转录进行体外扩增均获得GAV、GPV和PAV三种株系的特异性目的基 因片段，建立了大麦黄矮病毒RT—PCR检测体系。对12个混合侵染后代进行了检测，混合 侵染后代用GAV的cP基因引物对扩增均获得了目的基因。用GAV的RTP基因引物对扩增， corn。 +作者简介：刘艳，女，硕士，助理研究员，主要从事植物病毒病研究。E—mail：yliucaas@126 256 中国植物病理学会2004年学术年会论文集 H3、H5、H6未见特异性带。而用GPV的CP与RTP基因的引物对均未能扩增出目的片段。禾 谷缢管蚜传毒株可扩增出GAV的目的基因而检测不到GPV，说明所测定的混合侵染后代中存 在异源包衣壳。通过部分侵染后代的cP和RTP基因核苷酸序列比较发现不论是麦长管蚜传 毒株还是禾谷缢管蚜传毒株，均未发现异常序列，仅有几个碱基的差异。初步认为所测定 的混合侵染后代中没有发生基因重组。 参考文献 [t]CreamerR，FaikBW．DirectdetecfionoftranscapsidatedbarleyyeHow Gen．Virol，1990，71：211-217 plants[J】J intheanlinoacid ofthecoat domainof 【2】JoHy，C．A．，andMayo．M．A