诱导不同血压对大鼠永久性脑缺血后神经保护研究的论文.pdfVIP

生冒医短进金垄经筮挝医!匝盆金==筮四盾全邑岱麦盔金迨塞堑缉 ·293· 诱导不同血压对大鼠永久性脑 缺血后神经保护研究 邱永明张宁杨修章卫桥缪亦峰 急性脑缺血发生后最直接的治疗途径就是恢复梗塞动脉以下区域的血液供应。系统血压以及脑 灌注压的维持是脑缺血病理生理学基本的因素，直接影响缺血后分子级联反应的发生和神经细胞的 存活。 目前由于有意人为的改变急性脑缺血发生后血压的处理与神经功能预后的临床资料缺乏。对于 超过有效再灌注时间窗的永久性脑缺血患者，如何通过血压调节使缺血区域未关闭的动脉以及侧枝循 环恢复血流是脑缺血区域神经功能保护的关键。 材料与方法 1．实验动物及分组：sD大鼠，雄性，280一3059(上海中国科学院实验动物中心)。实验期间，室温 实验过程中脑缺血模型不成功，或者中途死亡，或者没有按照预期的进行血压的干预的大鼠全部剔除 实验，重新补充大鼠。所有实验动物的使用，符合相关的管理准则。所有动物都得到了人性化的对待。 2．股动脉、股静脉捕管：10％水合氯醛(300mg／kg)腹腔麻醉，分离股动脉和股静脉。经股静脉、 穿出，并用特制的“马鞍”固定。术后恢复两天。插入动脉内的导管长度=大鼠体重g／100+lcm。 3．大鼠永久性脑缺血线栓模型的制作：颈内动脉腔内线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型。2％的 异氟烷吸人麻醉，仰卧固定，颈部正中切开，暴露右侧颈总动脉(ccA)，右侧颈外动脉(EcA)游离并用 Ethicon 6／0丝线结扎ECA的分支，并分别结扎ECA远端，在ECA结扎端近端剪一小口，将栓线(3一O Pmlene外科尼龙线)插入直到颈内、颈外分叉处并疏松结扎。在远心端将EcA剪断，将其翻向腹侧，拉 线18～19mm，阻断右侧大脑中动脉的起源，此即完成右侧大脑中动脉阻塞，缝合切口。 4．实验的干预过程：大鼠动、静脉置管恢复两天后进行下面的实验。2％的异氟烷吸入麻醉，制作 大鼠线拴大脑中动脉梗塞(MCAO)模型，3h后观察动物神经功能评分，评分为3分的说明脑梗成功( v8上海奥尔科特生物科技有限公司)。等待动物平稳后(约10分钟)开始监测血压，并记录。使用微 来控制血压。血压始终记录，观察并调节微量输液泵的用量，使血压达到预定的值。每10分钟给与标 记一次，取标记前后3分钟的平均动脉压的平均值记为当时的血压，并做统计学处理。实验过程中大 鼠的肛温维持在36．5℃～37．5℃。对照组：仅仅泵人生理盐水；早期诱导升高血压组：在脑缺血3h就 诱导血压升高；诱导降低血压组：在脑缺血3h就诱导血压降低；晚期诱导升高血压组：在脑缺血18h诱 作者单位：200127上海交通大学医学院附属仁济医院神经外科(邱永明、张宁、杨修、章卫桥、缪亦峰)；厦门中医院神经外 科(杨修) ·294· 导血压升高。各个小组在进行6h控制性血压干预结束，大鼠被放回笼子，自由饮水进食。 醉大鼠，断头处死迅速取下大脑组织标本并置于0℃冰冻生理盐水5min，从前极lmm开始每隔2mm行 冠状切片，每个标本分为5个冠状切面(每片厚2mm)，放人2％的氯化三苯基四氮唑(，I-I．C)溶液中， Ge珊any)测量梗死面积，计算梗塞区域体积的百分比。 6．神经功能评分：分别在梗死后3h以及梗死24h时对大鼠进行双盲神经功能评分。三人评定，取 平均值。采用Bederson计分法：0分：提尾后(距地1米)，大鼠两前爪完全伸向地面，不伴其他神经损 害症状；1分：提尾后(距地l米)右侧上肢屈曲内收，肩部内旋；2分：拉住鼠尾，于大鼠肩后施加侧压， 向左侧的抗推能力减弱；3分：大鼠能在地面上走动，拉其尾巴后有向右侧绕圈现象。评分为3分的大 鼠在再灌注之前用来分析梗死体积，分析血压的变化。 7．统计分析：实验数据以元±s形式表示，数据显著性统计用SAS10．0软件进行方差分析 (ANOVA)进行。在此基础上两组均数相比时采用了￡检验。 结 果 1．生理指标观察：实验过程中动物在缺血前，血压干预过程中，脑缺血24h时生理学参数没有显著 的差异，大鼠的体温、呼吸都在预定的范围内。实验过程中死亡的大鼠，以及血压干预不理想的大鼠 全部剔出实验。 2．血压监测情况：正常清醒的sD大鼠平均动脉压在(9