呼吸道标本中大肠埃希菌AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析.pdfVIP

童丛医学2008年9月第37卷第18期 2087 ·经验交流· 呼吸道标本中大肠埃希菌AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析 张建辉 (四川省绵阳中心医院检验科621000) 理用药。方法 果大肠埃希茵AmpC酶、ESBLs、AmpC酶+ESBLs检出率分别为1．3％、22．3％、2．3oA，AmpC酶和ESBLs总检出率分别为3． 药率均高于平均水平。结论大肠埃希茵对哥内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs，对产酶茵株临床经验 用药可选用碳青霉烯类抗生素。 关键词：AmpC酶；ESBLs；大肠埃希茵；耐药 中图分类号：R446．5；R969．3 文献标识码：B 文章编号：1671—8348(2008)18—2087—02一 随着广谱抗生素的大量应用，细菌耐药日趋严重，耐药的 2结 果 2．1 从280株大肠埃希菌中 产生已严重影响抗生素的疗效，并成为临床普遍关注的问题。 AmpC酶和ESBLs检出结果 尤其第3、第4代头孢菌素的I临床应用使得革兰阴性杆菌耐药 性更加突出，临床治疗更加困难。研究表明，革兰阴性杆菌对 p内酰胺类抗生索耐药主要是由质粒介导的超广谱p内酰胺 ESBLs总检出率分别为3．I％和26．6％。 2．2 一 酶(extended-spectrump-lactamases。ESBLs)以及由质粒和染280株大肠埃希菌耐药结果，见表1。 色体介导的AmpCp_内酰胺酶引起。大肠埃希菌是临床感染 表1 280株大肠埃希菌对抗生素的耐药情况(％产 的常见病原菌，采用改良酶提取物三维实验法检测大肠埃希菌 AmpC酶和ESBLs，并对其耐药性进行分析，揭示其主要耐药 机制和产酶情况，指导临床合理用药。 1材辩与方法 ’ 1．1材料 1．1．1菌株来源实验菌株为2006年1月至2008年4月本 院临床微生物室分离的大肠埃希菌280株。质控菌株为大肠 埃希菌(ATCC25922)，肺炎克雷伯菌(ATCC700603)，阴沟肠 杆菌(029)，阴沟肠杆菌(029M)。 1．1．2试剂与药敏纸片增菌培养基为LB肉汤(美国BD公 司生产)iM-H琼脂(重庆庞通科贸有限公司产品)；氯睦西林 (西南制药三厂，批号：020703)，氨苄西林、头孢唑啉、庆大霉 素、阿米卡星、阿莫西林／克拉维酸、哌拉西林／他唑巴坦、头孢 呋辛钠、头孢吡肟、头孢西丁、头孢噻肟、头孢曲松、亚胺培南、 嚷拉西林、复方新诺明、环丙沙星、氨曲南、头孢他啶、头孢噻 肟／克拉维酸、头孢他啶／克拉维酸均为oXOID产品，经室内 质拉符合要求者方可应用。 ． 1。2方法 1．2．1p-内酰胺酶的提取按文献[13进行，并略做改动。 1．2．2 采用改良三维实验法n]，若 AmpC酶、ESBLs检测 观察到狭逢与抑菌圈交接处出现扩大的长菌区域，视为三维实 验阳性。邻氯西林单独加入抑酶实验阳性即AmpC酶阳性， 克拉维酸单独加入抑酶实验阳性即ESBLs阳性，同时加入邻 氯西林和克拉维酸抑酶实验阳性即AmpC酶和阳性。用阴沟 肠杆菌(029M)作为持续高产AmpC酶阳性对照，阴沟肠杆菌 对17种监测抗生素(亚胺堵南除外)的耐药率均高于平均水 (029)和肺炎克雷伯菌(ATCC700603)作为阴性对照，肺炎克 平。 雷伯菌(ATCC700603)作为ESBLs阳性对照，阴沟肠杆菌 (029M)作为阴性对照。 3讨 论 1．2．3药敏实验采用K-B法，操作及判断标准采用NC-ArnpC酶于1988年首次被发现以来在世界各地均有报 CLS2007。