mtTFA基因甲基化在慢性阻塞性肺疾病肺血管内皮细胞凋亡中作用.pdf

】壹±堂僮论室 虫塞摘要 摘要 第一部分COPD患者肺组织中mtTFA、COXII的表达及其与肺血 管内皮细胞凋亡的关系 II的表达、肺血 目的：检测COPD患者肺组织中mtTFA、COX 管内皮细胞凋亡的变化，分析它们之间的关系，探讨mtTFA在COPD 发病机制中的可能作用。 方法：2007年9月至2008年8月在中南大学湘雅二医院胸外科 行肺叶切除术或肺段切除术的周围型肺癌患者病例2l例，根据COPD 例。TUNEL法检测肺血管内皮细胞凋亡指数，分光光度法检测COX mRNA、COXII 活性，普通RT．PCR和real．timeRT．PCR检测mtTFA 和表达，western．blot检测COXII蛋白表达。使用SPSS13．0统计软 件包进行数据分析，正态分布的各组计量资料以(；姆)表示，两组 间均数比较采用独立样本t检验，变量间相关性分析采用单因素直线 相关分析(Pearson)，P0．05为差异有统计学意义。 组织mtTFA rnRNA、mtTFA蛋白的相对 (0．32+0．07)，非COPD组肺组织mtTFA COPD组肺组织COX活性、COXIImRNA、COX II蛋白的相对表达 10～]U／mg、 量分别为【(4．4+0．9)x IImRNA、COX COPD组肺组织COX活性、COX II蛋白的相对表达 II 组肺组织COX活性、COXmRNA和COXII蛋白表达均较非COPD 活性与肺血管内皮细胞凋亡指数呈负相关(，=．O．756，P0．01)；肺 组织mtTFA蛋白表达与FEVl％Pre、COXII蛋白表达、COX活性均 细胞凋亡指数、吸烟指数均呈负相关(，．=．0．749，r=．0．763，均 P0．01)。 结论： (1)COPD患者肺血管内皮细胞凋亡增加。(2)COPD 患者肺组织mtTFA、COXII表达下降，COX活性下降。(3)吸烟 肺血管内皮细胞凋亡。 关键词：慢性阻塞性肺疾病，肺血管内皮细胞，凋亡，线粒体转 录因子A，细胞色素C氧化酶II亚基 Il 第二部分COPD患者肺组织mtTFA基因甲基化状态的研究 目的：探讨COPD患者肺组织mtTFA基因启动子区甲基化状态。 方法：2007年9月至2008年8月在中南大学湘雅二医院胸外科 行肺叶切除术或肺段切除术的周围型肺癌患者病例21例，根据COPD 1 例。收集患者术中肺组织标本，提取肺组织基因组DNA，亚硫酸氢 钠基因组测序法(BSP)检测mtTFA基因启动子区甲基化状态。使 用SPSS13．0统计软件包进行数据分析，计量资料以(；如)表示， 两组问均数比较采用独立样本t检验。P0．05为差异有统计学意义。 结果：非COPD患者肺组织mtTFA基因启动子区不存在甲基化 基化的CpG位点，平均甲基化率为(27．8±3．6)％。 结论：COPD患者肺组织mtTFA基因启动子区存在甲基化的CpG 位点。 关键词：慢性阻塞性肺疾病，线粒体转录因子A，甲基化 表达下降中的作用 其中的作用，并了解mtTFA基因甲基化是否参与其中。 HI 方法：体外培养HUVEC，给予不同浓度(O％．10％)和不同时