MicroRNA-222在结肠癌细胞系中的生物学作用及机制及研究.pdf

目录 中文摘要………………………………………………………………………………………2 英文摘要………………………………………………………………………………．4 前言………………………………………………………………………………………………6 第一部分miR．222对HCT8和HCTll6生物学行为的影响 引言………………………………………………………………………………………………8 实验材料和方法……………………………………………………………………………．8 实验结果………………………………………………………………………………………．13 讨论……………………………………………………………………………………………………………………………23 第二部分miR．222对HCT8药物敏感性的影响 引言……………………………………………………………………………………………．．29 实验材料和方法………………………………………………………………………………．29 实验结果………………………………………………………………………………………．．30 讨论……………………………………………………………………………………………………………………………34 第三部分miR．222促进肿瘤细胞迁移的下游靶基因预测 引言……………………………………………………………………………………………．．36 实验材料和方法………………………………………………………………………………．36 实验结果…………………………………………………………………………………………37 讨论……………………………………………………………………………………………………………………………38 结论………………………………………………………………………………………………．．43 不足与展望……………………………………………………………………………………44 参考文献………………………………………………………………………………．45 文献综述………………………………………………………………………………．．50 主要缩略词表………………………………………………………………………………．67 个人简历………………………………………………………………………………………69 致谢…………………………………………………………………………………．．70 独创性声明………………………………………………………………………．71 摘要 结直肠癌(colorectalcancer，CRC)是世界上发病率第三位的恶性肿瘤，居于 恶性肿瘤相关死亡原因第四位。尽管近年来手术、化疗、放疗和靶向治疗等治疗方 法有了较大进步，但CRC的高转移率和高病死率仍是重大的难题，IV期患者的5年 生存率仍仅有8．1％。因此进一步阐明结直肠癌发生发展的分子机制，尤其是肿瘤转 移的机制，采取个体化治疗，成为结直肠癌研究的热点。 转录后水平调控基因表达。miRNAs广泛存在于各种组织中，参与细胞增殖、分化、 凋亡等过程，其异常缺失或增多与各种肿瘤的发生发展相关。 北京协和医院肿瘤内科在结直肠癌组织标本miRNAs表达谱的研究中发现，与 癌旁组织相比，miR．222表达量升高，与国外的研究报道一致，提示miR．222可能 对CRC的发生发展有促进作用。然而目前尚无miR．222在结直肠癌中作用机制的报 道。 mimics和miR一222 PCR 方法验证转染效率。观察miR一222过表达和抑制后结肠癌细胞系增殖、周期、凋亡、 迁移和化疗药物敏感性的变化，并对miR一222的作用机制做了初步探讨。 VSmimicscontrol mimics 同时间细胞增值率没有统计学差异(1、2、3天miR．222 inhibitorVSinhibitorcontrol P0．05：miR．222 P0．05)；用流式细胞仪测定处于G0／G1、