RGD与细胞穿膜肽共修饰miRNA脂质体的构建及抗肿瘤研究.pdfVIP

中华肿瘤防治杂志 2015年 2月第 22卷第 3期 CHINJCANCERPREVTREAT，February2015，Vo1．22 No．3 《实验研究／论著l RGD与细胞穿膜肽共修饰 miRNA脂质体的 构建及抗肿瘤研究 蔺伟 李庭 杜金瑞。 1．莱芜市人 民医院骨科，山东 莱芜 271100 2．莱芜市莱城 区人 民医院放射科，山东 莱芜 271100 【摘要】 目的 制备 RGD和细胞 穿膜肽 TAT共修饰载microRNA一34a脂质体 (RGD／TAT—miLPs一34a)，对其理化性质 进行表征，研 究脂 质体与人 骨 肉瘤 MG63细胞的亲和 力和增 殖抑 制作 用。方法 采用薄膜 分散 法制备 ROD／ TAT—miLPs一34a；定量细胞摄取实验研 究 MG63细胞对 RGD／TAT—miLPs一34a的摄取效率以及对脂质体摄取 的影响因 素。定性共聚焦实验观察肿瘤细胞对脂质体的摄取。MTT实验研究RGD／TAT—miLPs-34a对MG63细胞的细胞毒性； 构建骨 肉瘤异位瘤模型 ，研 究不 同脂质体对肿瘤的生长抑制率。结果 MG63细胞在与脂质体共 同孵 育 4h后 ，RGD／ TAT—miLPs一34a组摄 取效率为 (185．3±17．5) ，TAT—miLPs一34a组 为 (67．5±8．6) ，RGD-miLPs一34a组 为 (82．7± 9．5) ，miLPs34a组为(40．9±7．8) ，差异有统计学意义，H=27．93，P0．001。RGD／TAT—miLPs一34a4h摄取效率 是 2h摄取效率(101．3±12．4) 的 1．83倍 ，差异有统计学意义，一5．58，P一0．001。骨 肉瘤 MG63细胞给药 48h后 ， RGD／TATmiLPs～34a组 MG63细胞存 活率为 (I8．5±5．3) ，TAT—miLPs一34a组为 (36．1±5．2) 、RGD-miLPs一34a组 为(44．8±6．7) ，miLPs一34a组为(67．7±8．9) ，生理盐水组为(98．7±3．6) ，差异有统计学意义，H一19．271，P 0．001。荷瘤裸 鼠治疗实验 miLPs一34a组对肿瘤生长的抑制率为(19．4±3．2) ，RGD-miLPs一34a组为 (39．6±4．8) ， TAT—miLPs一34a组为(42．6±6．5)％，RGD／TAT—railPs一34a组为(73．7±7．1) ，生理盐水组为 0，差异有统计 学意义， F一145．237，P0．001。结论 细胞穿膜肽与 RGD共修饰载miRNA脂质体能够有效识别并穿透肿瘤细胞膜进入肿瘤 细胞 ，是一种潜在高效的骨 肉瘤靶 向给药系统 。 【关键词】 肿瘤靶 向；基 因治疗 ；骨 肉瘤 ；整合素受体 ；细胞穿膜肽 中华肿瘤防治杂志 ，2015，22(3)：179—183 Anti--tumoractivityofmiRNA throughdual_。targetingcarrierofRGD andcellpermeablepeptidesconjugatedliposomes LIN Wei1．LITing1．DUJin—rui2 1．DepartmentofOrthopedics，LaiwuPeople’sHospital，Laiwu271100，P．R．China 2．DepartmentofRadiology，People’sHospitalofLaiwuLaichengDistrict，Laiwu271100，P．R．China -[ABSTRACT] OBJECTIVE ToprepareRGDandcellpermeablepeptidesTATc