波长型SPR检测仪的灵敏度探讨.pdfVIP

Vo1．31 高 等 学 校 化 学 学报 No．11 2010年 11月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 2157～2l61 波长型 SPR检测仪的灵敏度探讨 李海波，徐抒平，5t0 钰，菅晓光，徐蔚青 (吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室，长春 130012) 摘要 利用自行设计构建的可变入射角的波长型表面等离子体共振 (SPR)检测仪，在不同浓度的蔗糖溶液 中测定了不同人射角度 (80。一66。)的共振曲线，经过处理得到共振峰位、半高宽及灵敏度随入射角和样品 折射率变化的三维图像．在此基础上探讨了波长型SPR检测仪的主要参数对仪器性能的影响，从理论和实 验上证明了影响灵敏度的主要因素为共振波长，并且随着共振波长的增大，检测灵敏度迅速提高． 关键词 表面等离子体共振 (SPR)；波长型 SPR检测仪；灵敏度；入射角；共振波长 中图分类号 0657 文献标识码 A 文章编号 0251-0790f2010)11-2157-05 自从20世纪8O年代Liedberg等 ¨将表面等离子体共振 (SPR)检测方法用于生物传感领域，SPR 检测技术获得了空前的发展．经过了30年的发展后，SPR技术已经成为一种比较成熟且广泛用于生物 及化学领域的检测方法，尤其适合于生物分子之间相互作用的研究．目前 SPR检测方法主要有消失场 激发和光栅激发两种激发方式，其中消失场激发装置更容易实现，灵敏度更高，SPR检测仪主要采用 这种方式．消失场激发方式分为用单色光激发检i贝0共振角的角度型SPR系统和用 白光激发检测共振波 长的波长型SPR系统．角度型SPR系统比较成熟，大多数商品仪器采用这种检测方式，目前已经实现 了微型化 ．波长型SPR生化分析系统由于光谱仪技术的成熟而具有装置更简单、工作性能更稳定和 容易进行实时监测等优势，使得这类仪器发展迅速 4J，并已商品化，如Thermo公司的Nicolet傅里叶 型生物检测系统．目前报道主要集 中在生物和化学检测体系，仪器结构一般采用角度型或固定角度入 射的波长型 ，而探讨入射角及样品的折射率等与灵敏度关系的实验和计算则较少，而这些数据是指 导仪器设计的重要参数． SPR检测技术的目标之一是高灵敏度检测．Akimoto等。。报道了在不同入射角度下，共振波长的 灵敏度会发生改变，并且在入射角较小(68。)时其仪器的灵敏度和检出限都明显提高 j．为了系统地 研究不同入射角度及不同折射率的介质对灵敏度的影响，为仪器的设计及制造提供参考和指导，我们 构建了一套可以改变入射角的波长型SPR检测装置 ，并用不同浓度的蔗糖溶液作为待测物质进行了一 系列实验，获得了不同入射角度下的波长型SPR检测仪的共振峰位、半高宽及灵敏度等实验参数．探 讨了波长型SPR检测仪随入射光角度的改变对灵敏度的影响，从理论和实验上分析了影响灵敏度的一 些因素．为波长型SPR检测仪器的设计以及实验参数选取提供了重要的参考价值． 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 实验仪器为 自行设计构建的可改变激发光入射角的波长型SPR检测仪，示意图见图1．由溴钨灯 发出的白光 (发射光波长400～950Fin)经光纤传输到光纤耦合器上 ，形成平行 的白光光束 ，承载光纤 耦合器的旋臂固定在测角仪基座上．人射光入射到半圆柱棱镜(BK7玻璃，折射率为 1．515)上，棱镜 底面镀有约50nm的金膜 ，入射光在棱镜一金膜界面形成的消失波激发金膜与样 品界面的表面等离子 收稿 日期：2010~5—10． 基金项 目：国家 自然科学基金 (批 准号20973075和高等学校博士学科点专项科研课题 (批准号 20090061120089)资助． 联系人简介：徐蔚青，男．博士，教授，博士生导师，主要从事纳米材料光谱学研究．E．mail：xuwq@jlu．edu．CB 高等 学校 化 学 学报 Vo1．31