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绿僵菌研究的新进展 郭素萍 麻秀芳 (山西省医药与生命科学研究院) 【摘要】绿僵菌是虫生真菌．早在1879年大量繁殖绿僵菌防治奥地利丽金龟以来，绿僵茵就成为害虫微 生物防治的主角之一。尽管绿僵菌用于防治农林害虫已有近百年的历史，但制剂的商品化进展却十分缓慢。 在巴西多采用塑料袋培育法或类似的方法生产孢子粉，喷洒孢子粉的水悬浮液防治地上害虫，或将孢子粉 连同培养基一起撒在地面上然后翻入土中，防治农作物地下害虫．近来绿僵茵用于防治农作物害虫棉铃虫、 菜青虫、小菜蛾等田问试验已获得成功，且采用液体发酵培养生产绿僵茵菌剂，成本低、无污染、使用起 来方便、是一种理想的培养方式，这对于今后的研究开发扩展了思路，对绿僵菌制剂生产产业化和环境友 好绿色生态农业的发展起到非常重要的作用． 【关键词】绿僵茵；液体发酵培养；生物防治；研究进展 早在1879年大量繁殖绿僵菌防治奥地利丽金龟(Anisopliaeaustriaea)以来，绿僵菌就成为害虫 微生物防治的主角之一。由于本世纪初人们对绿僵菌防治效果不稳定感到失望，对绿僵菌的研究仅限于分 类、培养特性、感染机制及其影响因素等方面。五六十年代，人们开始对绿僵菌的形态、分类、生理生化 进行了系列的研究，八十年代末，人们对绿僵菌菌剂的生产及生物防治进行了深一步的研究。随着巴西和 澳大利亚广泛使用金龟子绿僵菌防治甘蔗和牧草害虫取得较大进展，以及在非洲用黄绿绿僵菌防治蝗虫的 试验初步成功，对绿僵菌的研究进入了一个高潮。 尽管绿僵菌用于防治农林害虫已有近百年的历史，但制剂的商品化进展却十分缓慢。真正商品化的制 1020，用于防治葡萄 剂只有德国拜耳公司(BayerAG)80年代开发的M．anisopliae菌丝体颗粒剂BIO sulcatus 黑耳喙象(0tiorrhynchusFabricius)。它的生产技术很独特，在发酵罐中使用特殊工艺使 菌丝体形成直径卜1．5mm的菌丝体，离心分离后造粒，用沸腾床干燥为含水量lO％(w／W)的颗粒，然 后真空包装储存。4C条件下可保存活力18个月，20℃时为5个月。在巴西多采用塑料袋培育法或类似 的方法生产孢子粉，喷洒孢子粉的水悬浮液防治地上害虫，或将孢子粉连同培养基一起撤在地面上然后翻 入土中，防治农作物地下害虫，但这些很难形成商业规模，而且固体培养存在时间长，易污染的问题。解 决这些问题，我们可以采用液体发酵培养生产绿僵菌菌剂，液体培养时间短，成本低，无污染，利用起来 方便，是一种理想的培养方式。 ’在生物防治方面，尽管国外已大量使用绿僵菌菌剂用于森林害虫、牧草害虫的防治，但真正用于农 作物害虫的防治报道的很少。近来我们发现绿僵菌用于防治农作物害虫如：棉铃虫、菜青虫、小菜蛾等 田间试验也非常成功，而且防治棉铃虫试验效果尤为突出，这对于我们今后的研究开发扩展了思路，对 绿僵菌制剂生产产业化和环境友好绿色生态农业的发展具有非常重要的意义。为了尽快开发出一种污染 小，成本低，菌剂易生产，用于农作物病虫害防治效果显著的新型生物杀虫剂，我们做了大量的工作。 一菌株的分离、纯化 八五年开始，我们对金龟子绿僵菌进行了分离、纯化。通过几年的分离、活化、诱变，我们已经得 菌株是我们从四川康定采集的新鲜冬虫夏草上分离纯化的一新种，经中科院有关专家鉴定定名为金龟子 绿僵菌(Meterhizium 不仅如此，我们还要尽量筛选低温菌株。绿僵菌是防治地下害虫最有潜力的病原物，但温度是病害发生 与否的关键，一般绿僵菌的最适生长温度为25—28℃，温带地区的土壤温度除夏季的很短一段时间外 351 大都低于25℃，所以筛选在低温条件下能生长侵染的菌株是提高防效的重要途径。除此之外，我们还 对高毒力菌株进行了筛选。筛选高毒力菌株，常规方法多是从体表有明显真菌感染症状的僵虫上分离。 再就是利用选择性培养基可直接从土壤中分离绿僵菌，此法用于研究绿僵菌在土壤中的动态。僵虫分离 法是目前研究中最常用的方法，但寻找僵虫的工作量大，且受季节限制，特别是从土栖昆虫中采集僵虫 就更困难。分子生物学技术的发展为菌株改良提供了手段。绿僵菌的毒力与其分泌的昆虫表皮降解酶有 直接关系。 二金龟子绿僵菌的培养 我们对绿僵菌