离子交换法分离纯化酶反应液中5-氟尿苷地研究.pdfVIP

离子交换法分离纯化酶反应液中5-氟尿苷的研究 倪孟祥 王刚 顾觉奋 中国药科大学生命科学与技术学院，南京210009 摘要 为开发从酶反应液中分离纯化5-氟尿苷的方法，研究了利用阴离子交换树 脂以及硅胶柱色谱实现转化产物分离纯化的工艺;实验采用HPLC为检测方法， 以5-氟尿苷含量为考察指标，从吸附量，洗脱率，回收率的角度考察了各种条件 的影响。最终确定以D301树脂为吸附剂；最佳吸附条件为动态吸附，温度25℃， pH8；动态洗脱，洗脱剂5％NaCl溶液，体积流量为3BV/h；再利用硅胶柱色谱， 采用200-300目硅胶，以正己烷：乙酸乙酯=12：88作为洗脱剂，洗脱后结晶可 得到5-氟尿苷纯品，色谱纯，最终收率72.4％。 关键词 5-氟尿苷；微生物转化；阴离子交换；硅胶柱色谱；分离纯化 弱碱性阴离子交换树脂D301，HZD．9，D315购自上海华震科技有限公司； D301，强碱性阴离子 D380购自南开大学树脂厂；弱碱性阴离子交换树脂Seplite D201购自西安蓝晓科技有限公司。 ． 交换树脂Sepl