抗-IgM诱导人B淋巴瘤Daudi细胞凋亡地研究.pdfVIP

抗-IgM诱导人B辩巴窟Daudi细胞撼亡的研究 237 抗．IgM诱导人B淋巴瘤Daudi细胞凋亡的研究 t 张帆朱红霞徐宁志 自70年代以来，人们就认识到细胞凋亡在肿瘤的发生、发展中扮演着重要角色。肿瘤的 发生，是由于细胞增殖与细胞凋亡平衡失调的结果…。细胞凋亡在肿瘤生长过程中起负调控 作用，可以阻遏肿瘤迅速生长。人们在肿瘤治疗的长期实践中，逐渐认识到可以通过诱导肿瘤 细胞凋亡，以达到治疗肿瘤的目的。而且，能否诱导肿瘤细胞的凋亡很可能是决定化疗效果的 protein， MAPkinase N．terminal (extraceUularsignal-regulatedkinases)，JNK(c-Jun protein 定的研究【2J，但细胞及发育状态不同，引用体系和研究方法亦不同，结果各异，其机制至今不 是十分明了。 B淋巴细胞是人体免疫系统的重要组成部分。B淋巴细胞发育时需经过正负选择，正相 选择结果是B淋巴细胞活化，为机体提供参与免疫应答的正常B淋巴细胞。负相选择则导致 B淋巴细胞凋亡，是免疫应答时驱除自身反应性B细胞的基本机制。抗原刺激B细胞的活化， cell 依赖于抗原与其表面的抗原受体复台物(B antigen 淋巴细胞凋亡是近年免疫学研究的热点。虽然对其进行了大量研究【4qJ，但发生机制仍未完 讨其发生机制，以期很好地认识B淋巴细胞恶性肿瘤发生、发展的分子机制以及探讨可能的 治疗肿瘤的新途径。 材料与方法 剂盒购自Bio-Lab公司。 的RPMI 1640，5％O嘎37℃孵箱中培养。 3．细胞表面受体分析取淋巴细胞混悬液1×106细胞／ml，50m。加入兔抗人IgM多克 Hd 000 min。加入10 隆抗体工作液50出，37℃水浴，30 PBS混匀。室温，离心(1r／min)10 作者单位：100021北京，中国医学科学院肿瘤研究所 中国癌症研兜进展@ 000 ml 10面PBS混匀。室温，离心(1r／min)10min，弃上清，洗涤细胞2次。加入1 PBS液 棍匀。FACS检测。 RPMI 1640培养，并加入终浓度为O～200 vg／ml的IgM抗体，分别刺激48和72h。于终止 培养前12 h，加入3H-TdR，收集细胞，液体闪烁仪检测epm。 030r／min，室温离心5～10 养，并加入IgM抗体，分别于指定时间800--1 min，收集细胞，取 conjugatel _“l+79一去离子水)，于暗室中孵育15 40 m+360pl去离子水)。1h内用FACS测试，用FLl／FL2软件分析结果。 6．PI染色法分析细胞凋亡和细胞周期AnnexinV法中处理的1／2细胞．收集于离心管 000 中，800--1