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旋光活性物质旋光度的测定.ppt
旋光活性物质旋光度的测定 旋光活性物质旋光度的测定 实验目的 :了解旋光仪测定旋光活性物质旋光度的基本原理。学会圆盘旋光仪和WZZ-2S自动数显旋光仪的正确使用方法,掌握由物质比旋光度来计算质量分数的方法。 实验内容 :旋光仪的使用,旋光活性物质溶液质量分数的测 定。 2. 比旋光度 旋光性物质的旋光度的大小决定于该物质的分子结构,并与测定时溶液的浓度、盛液的长度、测定温度、所用光源波长等因素有关。 上式中: α——被测溶液的旋光度; C ——被测物质B的质量浓度,单位为 g·mL-1,当测定 物是纯液体时,C为该物质的密度; L ——测定管的长度,单位为dm; D ——钠光波长;λ=589.3nm t ——测定时的温度(℃)。 当物质溶液的浓度为1g/ml,盛液管的长度为1dm时,所测物质的旋光度即为比旋光度。 WZZ-2S自动数字显示旋光仪结构原理图 WZZ-2S自动数字显示旋光仪工作原理 仪器以钠光灯为光源,发出的光线通过聚光镜、小孔光柱和物镜后形成一束平行光,经过起偏镜后产生平行偏振光,这束偏振光经过有法拉弟效应的磁旋线圈时,其振动面产生50Hz的一定角度的往复振动,该偏振光线通过检偏镜透射到光电倍增管上,产生交变的光电讯号。 WZZ-2S自动数字显示旋光仪工作原理 当检偏镜的透光面与偏振光的振动面正交时,即为仪器的光学零点,此时出现平衡指示。而当偏振光通过一定旋光度的测试样品时,偏振光的振动面转过一个角度a,此时光电讯号就能驱动工作频率为50Hz的伺服电机,并通过蜗轮杆带动检偏镜转动?角而使仪器回到光学零点,此时读数盘上的示值即为所测物质的旋光度。 葡萄糖注射液含量的旋光法测定 葡萄糖分子结构中五个碳(C*)都是不对称碳原子,具有旋光性。 葡萄糖的α、β两种互变异构的比旋度相差很大,在溶液中存在变选现象,浓度较大的样品测定时应放置7小时以达平衡,加酸或弱碱可加速平衡。 [α]25D= +113.4° * 物质的旋光性 一、平面偏振光和物质的旋光性 1.平面偏振光 光波是一种电磁波,它的振动方向与前进方向垂直。 在光前进的方向上放一个(Nicol)棱晶或人造偏振片,只允许与棱晶晶轴互相平行的平面上振动的光线透过棱晶,而在其它平面上振动的光线则被挡住。这种只在一个平面上振动的光称为平面偏振光,简称偏振光或偏光。 2.物质的旋光性 能使平面偏振光振动平面旋转的性质称为旋光性。 能使偏振光振动平面向右旋转的物质称右旋体,能使偏振光振动平面向左旋转的物质称左旋体,使偏振光振动平面旋转的角度称为旋光度,用α表示。 二、旋光仪与比旋光度 1. 旋光仪 若下图的盛液管中为旋光性物质,当偏振光透过该物质时会使偏振光向左或右旋转一定的角度,如要使旋转一定的角度后的偏振光能透过检偏镜光栅,则必须将检偏镜旋转一定的角度,目镜处视野才明亮,测其旋转的角度即为该物质的旋光度α。如图所示 旋光仪工作原理示意图 钠光谱和25℃时葡萄糖的比旋度为[α]25D= +52.75° [α]25D= +52.75° [α]25D= +19.7° 圆盘旋光仪的光学系统 * *
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