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尚辅网 尚辅网 仪器分析教程 10.4 高效液相色谱法的分类 根据分离机理不同,高效液相色谱法分为液—液分配色谱法、液—固吸附色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法、离子色谱法和空间排阻色谱法等。 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 10.4 高效液相色谱法的分类 上一内容 下一内容 回主目录 返回 * 尚辅网 第10章 高效液相色谱法 10.4 高效液相色谱法的分类 High Performance Liquid Chromatography (HPLC) 10.4.1 液-液分配色谱法 10.4.2 液-固色谱法 10.4.3 离子交换色谱法 10.4.4 空间排阻色谱法 尚辅网 10.4.1 液—液分配色谱法 (Liquid—liquid partition chromatography) 固定相与流动相均为液体(互不相溶)。 1.基本原理 组分在固定相和流动相上的分配,分离顺序取决于分配系数的大小,分配系数K(或分配比k)大的组分,保留值大,后出柱。 尚辅网 10.4.1 液—液分配色谱法 (Liquid—liquid partition chromatography) (1)正相液—液色谱法 固定液极性大于流动相极性的色谱法。 应用:分离极性较强的化合物,如脂肪酸、甾醇类 、 类脂化合物 磷脂类化合物等有机物。 根据固定液和流动相的极性不同: (2)反相液—液色谱法 固定液极性小于流动相极性的色谱法。 应用:是目前应用的最多最有效的液相色谱法。适合于分离芳烃、 稠环芳烃及烷烃等非极性或弱极性化合物。 尚辅网 10.4.1 液—液分配色谱法 (Liquid—liquid partition chromatography) 2.液—液分配色谱固定相 早期为在全多孔型担体或表面多孔性担体上涂渍固定液,固定液流失,较少采用。 现多采用化学键合固定相:(将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。如:硅氧硅碳键型:≡Si—O—Si — C、硅氧碳键型:≡Si—O—C 等。 尚辅网 10.4.1 液—液分配色谱法 2.液—液分配色谱固定相 (1)传质快; (2)寿命长,稳定性好; (4)选择性好,可键合不同官能团; (5)有利于梯度洗脱。 化学键合固定相的特点: 尚辅网 10.4.1 液—液分配色谱法 (Liquid—liquid partition chromatography) 3.液—液分配色谱流动相 由洗脱剂和调节剂两部分组成。前者的作用是将试样溶解 和分离;后者则用以调节前者的极性和强度,以改变组分 在柱中的移动速度和分离状态。 对流动相的要求:①对试样有适当的溶解度,以防在柱头产生沉淀; ②与固定相不互溶,不与试样发生化学反应;③与所用检测器相匹配;④粘度应较小,以获得较高的柱效;⑤纯度高,毒性小,价格便宜,不 污染环境和腐蚀仪器。 尚辅网 10.4.1 液—液分配色谱法 (Liquid—liquid partition chromatography) 4.应用 液—液色谱法对极性化合物和非极性化合物都能达到满意的分离 效果。例如,Permaphase—ODS键合相反相液—液色谱对稠环芳烃完成了很好的分离。 尚辅网 10.4.2 液—固吸附色谱法 (Liquid-solid adsorption chromatography ) 1.分离原理 组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸;利用吸附剂对溶剂和各组分分子的吸附能力不同得以分离。 2.固定相 为固体吸附剂,极性:如硅胶、氧化铝等,非极性:活性炭等。较常使用的是5~10μm的硅胶吸附剂; 尚辅网 10.4.2 液—固吸附色谱法 (Liquid-solid adsorption chromatography ) 3.流动相 各种不同极性的一元溶剂或按一定比例混合的多元溶剂。 4.应用 不同类型的有机化合物及 几何异构体的分离分析。 如,有机氯农药的分析。 尚辅网 10.4.3 离子交换色谱法 (Ion-exchange chromatography ) 1.分离原理 组分在固定相上发生的反复离子交换反应;组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、
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