Na-%27%2b-，K-%27%2b--ATP酶α亚基参与大鼠缺血缺氧性脑损伤.pdfVIP

中文摘要 Na+，K+．ATP酶Q亚基参与大鼠缺血缺氧性脑损伤 摘 要 脑缺血后常伴有脑细胞的低能量状态、自由基和兴奋性氨基酸增多、 钙离子超载、细胞结构破坏等。其中脑细胞的能量代谢衰竭被认为是神经 元损伤的主要始动因素。在脑缺血、缺氧状态下，有氧代谢可转化为无氧 ^铲v 代谢，ATP生成的效率仅为正常时的l／18。 缺乏，酶活性降低，细胞外K+浓度升高，而细胞内大量N矿、Cl’、Ca2+在 K+大幅度升高的同时突然降低，由于渗透压的作用，组织间H20进入细胞 内，导致细胞毒性水肿【4j。 · 随之进一步加剧，由此可见，Na+，K+．ATP酶活性的改变参与了脑缺血后 脑水肿的发生和发展。 脑缺血在引起脑水肿之外，还可以引起细胞膜的去极化和突触前兴奋 受Ca2+调节的磷脂酶、蛋白酶、核酸内切酶等被激活，导致膜磷脂分解和 细胞骨架破坏，细胞产生不可逆性损伤。 由此可见，Na+，K+．ATP酶在脑缺血的发生、发展过程中起着重要的 作用。但目前对Na+，K+一ATP酶的研究大多数集中在心肌细胞、肾脏、骨 骼肌、血管平滑肌，而对脑组织Na+，K+一ATP酶的分布及其功能特性研究 较少，特别是其在脑缺血、缺氧状态下，功能和特性的改变及其可能机制 的研究甚少，本研究旨在选取对缺血较敏感的海马、皮层神经元，研究其 Na+，K+．ATP酶分布、特性及其在缺氧中的改变，并探讨其可能机制。 中文摘要 一、大鼠脑组织Na+，K+．ATP酶特性及其仅亚基的表达 目的： 研究大鼠脑组织Na+，K+一ATP酶特性及其c【亚基的表达。 方法： 在原代培养的海马神经元和海马、皮层离体脑片和整体动物上，采用 无机磷法和双酶法测定Na+，K+一ATP酶的活性；全细胞膜片钳技术，记 曩瓢， blot和免疫组织化学方法检测Na+，K+一ATP酶0c亚基蛋白表达的变化； 既染色和免疫荧光染色，观察神经元形态学改变。 结果： (1)不同种属、性别、月龄对大鼠Na+，K+．ATP酶活性的影响 乳鼠(15天)的海马和皮层组织Na+，K+．ArP酶的活性分别为 166．85土41．84(pmmo!／mgprotein／h)，245．06士36～(“mmol／mgprotein／h)， (104．33土35．18Ppmmol／mgprotein／h，141．4士38．9肛mmol／mgprotein／h， PO．05和0．01)。 78．9士8 (pmm01／mgprotein／11)，SD雌性大鼠酶活性为l1．6(pmmol／mg protei砒)， Wistar雌性大鼠酶活性为281．3土55．3(¨mmol／mg 雌性大鼠的酶活性高于SD雌性大鼠(PO．05)；在皮层组织，SD雄性大 鼠酶活性为122．9士90．9(pmmol／mgproteim)，SD雌性大鼠酶活性为 244．9土1 50．3士44．3 68．4(“mmol／mgprotei肌)，Wistar雄性大鼠酶活性为1 18．5士1 93．5(Iimm01／mg (pm