生物制药工艺学 教学课件 作者 吴晓英 主编 郭勇 主审 第十章 生物制品.ppt

尚辅网 尚辅网 尚辅网 亚单位疫苗 激发免疫反应仅仅需要病原体外壳蛋白 利用病原体的某些成分而不是整个病原体,是“亚基”疫苗。 尚辅网 亚单位疫苗 优点 采用纯化蛋白保证疫苗安全性和稳定性 缺点 纯化成本高 分离的蛋白不具有与病原体相同的构象，因此可能没有相应的抗原性 尚辅网 亚单位疫苗（example） 单纯疱疹病毒（HSV） 性传播疾病 潜在致癌性 脑炎和严重的眼部感染 亚单位疫苗可能是最有效的 减活或失活率必须是100％，否则，人群有感染危险 尚辅网 亚单位疫苗（example） HSV 抗原靶位是哪里？ HSV外膜糖蛋白gD 尚辅网 HSV gD 尚辅网 HSV gD糖蛋白疫苗 分离基因 克隆表达 纯化表达的蛋白 膜蛋白难以纯化分离 变异，去除膜绑定 尚辅网 变异修饰后的HSV糖蛋白 尚辅网 乙型肝炎病毒 形态与结构　　 完整的HBV颗粒亦称Dane颗粒，直径为42nm，具有双层核壳结构： 核心颗粒：直径为28nm。 颗粒内部：DNA和DNA多聚酶。 颗粒表面（内衣壳）：含有HBcAg 和HBeAg 。 外壳（包膜）：厚7nm。 脂质双层：含有HBsAg、PHSAr 和PreSAg蛋白质 尚辅网 乙肝病毒传染途径 尚辅网 乙肝病毒检测 尚辅网 HBV感染血清标志及其临床意义 HBsAg HBeAg 抗HBc 抗HBe 抗HBs 结 果 解 释 IgM IgG - - - - - + 感染过HBV或接种过乙肝疫苗,有免疫力 + - - - -/+ - 肝功正常为无症状携带者;肝功异常为正患乙肝; + - - + + - （小三阳）正患乙肝,肝炎趋向好转，有传染性 + +/- - + + - 正患肝炎,或趋于恢复，有传染性 + + +/- - - - （大三阳）正患乙肝,病毒复制,传染性强 - - - +/- + + 乙型肝炎恢复期 尚辅网 乙肝疫苗的制备－血源疫苗 特点: (1)血源取得困难; (2)疫苗需经安全试验,故费用大,生产周期达65周. (3)现已淘汰。 尚辅网 乙肝疫苗的制备－人工合成多肽疫苗 工艺过程:人工合成HBsAg的P25多肽,并在124与137位半胱氨酸残基之间引入-S-S-,使成环状多肽,用其免疫动物后,50%出现抗体应答. 特点:纯净,不会污染其他病毒,无传染性,原材料来源方便,但目前生产成本高,难以大量生产。 尚辅网 乙肝疫苗的制备－基因工程疫苗 工艺路线: (1)? 将HBV的DNA片段插入到质粒并引入到E.coli中,使其复制表达抗原物质。 (2)?将HBV的DNA片段插入到牛痘病毒,再由此病毒重组体感染细胞,可分泌HBsAg。 (3)用一含HbsAg的质粒转化中国仓鼠卵巢细胞(CHO),在该细胞中表达HbsAg蛋白,释放于培养液中,从培养液中提纯抗原蛋白。 尚辅网 曾研究过用真核和原核细胞作为表达宿主，包括哺乳动物细胞、植物细胞、酵母、细菌和病毒等。 目前大规模生产的表达系统有酿酒酵母、毕赤酵母和汉逊酵母等基因工程疫苗，其次为CHO细胞基因工程疫苗，还有HBsAg+PreS2或HBsAg+PreS1+ PreS2（CHO细胞和酵母表达系统）。 尚辅网 重组酵母基因工程乙肝疫苗 生产厂家:北京天坛生物、深圳康泰。 重组乙肝疫苗(CHO) 生产厂家:长春所、兰州所、华北制药 尚辅网 流感疫苗 流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。它的特点是潜伏期短，传播速度快，发病率高，流行过程短。多发生于冬春季，男女老少都有易感性，尤其在学校、幼儿园、机关、企业等集体单位易造成流行。 尚辅网 尚辅网 尚辅网 尚辅网 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 尚辅网 尚辅网 尚辅网 流感病毒致病力强，易发生变异，易引起暴发流行，迄今为止，世界已经发生过五次大的流行和许多次小流行，造成数十亿人发病，数千万人死亡。 1917-1919年，欧洲暴发流感，导致2 000万人死亡（第一次世界大战死亡人数只有850万人），是历史上最严重的流感疫症。 尚辅网 1957年2月流感在中国贵州暴发流行，其后散播至世界各地，全球受影响的人数占总人口的10%-30%，死亡率较