作业——真空冷冻干燥技术保护剂的研究.docVIP

目录 0 1 1 保护剂 1 1.1 保护剂的组成与功用 2 1.2 保护剂的特性 3 1.3 保护剂的作用机理 3 1.3.1 优先化作用 3 1.3.2 玻璃态假说 3 1.3.3 水代替假说 3 1.4 保护剂的效能及影响因素 4 2 真空冷冻干燥保护剂研究和应用 4 3 结语 6 真空冷冻干燥保护剂的 摘要：关键词 Study of cryoprotective agents during vacuum freeze-drying technology [Abstract] This article also gives a summary of the protectant type, function, action principle and application status of vacuum freeze-drying technology in the culture preservation. [Key words] culture preservation; freeze-drying；cryoprotective；optimization 0引言 真空冷冻干燥(vacuum freeze-drying)，也称作冷冻干燥(freeze-drying)，是物质干燥的方法之一。通常是将物料冻结到共晶点温度以下，在低压状态下，通过升华除去物料中水分的一种干燥方法。一般的干燥方法是将物料中的水分由液态转变为气态，而冷冻干燥是将物料中的水分先由液态转变为固态再由固体水分子直接升华成水汽抽出，最后使生物活性物质形成疏松、多孔样固状物的过程 [1-4]。 冷冻干燥技术最早于1813年由英国人Wollaston发明[]。1909年Shsckell试验用该方法对抗毒素、菌种、狂犬病毒及其它生物制品进行冻干保存，取得了较好效果。在第二次世界大战中，对血液制品的大量需求大大刺激了冷冻干燥技术的发展，从此该技术进入了工业应用阶段。此后，制冷和真空设备的飞速发展为快速发展冷冻干燥技术提供了强有力的物质条件。 冷冻干燥技术在生物医学领域的应用上具有许多特点。顾名思义，此技术全过程在低温真空的条件下进行，所以能有效地保护热敏性物质的生物活性，有效地降低了氧分子对微生物，酶等活性物质的作用，从而保护了物质的生物活性及性状；并且由于物质是在冻结状态下升华干燥的，干燥物呈海绵状结构，体积几乎不变，加水后能迅速溶解并恢复原来状态。最后，由于通过冷冻干燥可将物质中95%以上的水分除去，因此十分有利于冻干物的长期保藏而不致变质。 保护剂 鉴于真空冷冻干燥技术具有其他干燥法无法比拟的优点，已广泛应用于生物、化工、医药、食品等多个领域。目前微生物菌种保藏的主要应用技术之一就是真空冷冻干燥技术。但是在生物体的冷冻干燥和贮藏过程中，很多因素（例如，化学成分、冻结速率、冻结和脱水应力、玻璃化转变温度、干燥固体中剩余水分、贮藏环境的温度和湿度等）都会影响其中活性组分的稳定性甚至会导致失活。，因此为了保护微生物的活性，提高在冻干过程中菌种的存活率通常在冻干液中添加活性物质保护剂[]。 保护剂(protector)又称稳定剂(stabilizer)或分散剂。冻干保护剂cryoprotective）是指在冻干过程中及其后使制品的活性物质免受破坏的一类物质。冻干保护剂广泛用于微生物等一些生物制品。 保护剂的组成与功用 冻干保护剂通常由三类物质组成，并由此三类物质组合成适用于各种生物制品的各种类型的冻干保护剂。 低分子物质。包括糖类和氨基酸类，前者如葡萄糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖等，后者如谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸、赖氨酸等。低分子物质可产生均匀的混悬液，使微生物保持稳定的活存状态及对水分子起缓解作用；并能使冻干生物制品仍含有一定量水分；还可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状，从而增加溶解度。 高分子物质。范围很广，种类甚多。诸如白蛋白、血清、明胶、脱脂乳、各种液体培养基、淀粉、酵母浸膏以及聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羧甲基纤维素等合成聚合物。高分子物质在冻干生物制品中主要起骨架作用，防止低分子物质的碳化和氧化；保护活性物质不受加热的影响；使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，从而使溶解度增加。 抗氧化剂（antioxidant）。包括一些有机的和无机的物质，诸如抗坏血酸钠、硫脲、碘化钾、钼酸铵等。抗氧化剂具有抑制冻干制品中的酶作用，从而促进、保持微生物等活性物质的稳定性。 冻干保护剂可按照不同的方式进行分类，按其是否能渗到细胞内部，上述保护剂可分为渗透型和非渗透型两种，根据其化学性质，可分为多羟基化合物、糖类、氨基酸、聚合物、蛋白质等几大类等等[]。 各类微生物适用的保护剂甚多，各国的配制方法也各异。即使同一种制品所使用的保护剂组成也不一样