功能化磁性聚苯乙烯制备及其可逆固定化酶的研究.pdfVIP

功能化磁性聚苯乙烯制备及其可逆固定化酶的研究 赵光辉 王建芝 侯平平 李彦锋** 兰州大学化学化工学院，生物化工及环境技术研究所，兰州730000 磁性载体由于其超顺磁性的特性，已经被广泛用于固定化酶[1]、蛋白质的纯化、细胞的 分离、靶向药物等领域。但用其作为固定化酶的磁性载体必须具备以下特点：分布窄、磁性 高、超顺磁性、富含官能团.已经有许多途径用于制备超顺磁性聚苯乙烯，包括乳液聚合[2]，悬 浮聚合[3]分散聚合[4]，溶胀热溶剂法[5]，但这些方法很难同时满足这些应用需要。 本文介绍了一种新型的并且过程简便的制备单分散性的功能化磁性聚苯乙烯微球的方 法。首先，利用分散聚合法制备单分散性的聚苯乙烯(PS)微球。 兰州2012年7月21．23日 分别转变为65℃，65℃强d45℃。而对于自由酶来说，反应的最佳温度相对较窄。这也说 明了固定化酶比自由酶有更高的热抵抗性，可能是由于酶分子与载体的共价键连接，从而导 致其分子构象发生了改变。 ■■Fen”Ps-DE^JD4 —●re。0。oPs·D￡A．Tsc 啊h。o。“Ps啦A_∞lda∞k 图3游离酶和固定化酶的热稳定性对比 图4固定化酶的操作稳定性 从图3中可以看出，在65oC下浸泡160nlin，经固定化酶作用的Fc304@PS—DEA—DA， 而游离酶作用的仅有50％的保持活性。从以上的结果可以看出，酶在经过固定化后，由于 载体在空间上对酶分子产生了影响，从而提高了酶对热的相对稳定性，有利于酶用于较高温 度下催化反应，使其在工业上的应用成为可能。 重复使用性是考察固定化酶在应用方面的一项重要指标，尤其是在工业应用方面，其性 能好坏就显得更为重要，大部分酶在固定化以后，其使用和保存时间均明显延长，固定化酶 的这一特点很有使用价值，它也是固定化酶的一个重要参数。从图4中可以看出，固定化酶 使用。 在多次重复使用后，固定化酶也可能完全丧失其活性。重复使用性是考察固定化酶在应 用方面的一项重要指标，尤其是在工业应用方面，其性能好坏就显得更为重要。因此，这项 工作中研究再生的生物催化剂的目的意义在于用简捷的方法使其再生，而且在于固定化酶失 活后的循环利用和回收。观察到在连续5次吸附／脱附循环后糖化酶的吸附能力和活性恢复 没有显着的变化。这些结果表明，含有cu2+离子的磁性聚苯乙烯载体可反复使用于酶的固 定化。 参考文献 【1]z11aoG．H．，“Y．F，W抽gJ．z．，Zhu H．，4印，．朋rfcrD6f0，．BfD阳幽nD，【J】，20ll，9l：59l一601． 【2】XuH．，CuiL．L．，TongN．H．，GuH．C．，，彳肌．矾硎．S缸．【J]，2006，128：15582一15583． 【3】Ho而kD．，，凡枷．＆￡，胁彳?肋哆研．劭绷．[J】，200l，39：3707-3715． 【4】NiuM．，DuM．H．，GaoZ．Y．，YangC．H．，LuX．Y．，QiaoR．R．，Gao M．Y．，胁crD，，，o，．JR印耐 C伽朋“n[J】，2010，31：1805—1810． C．L．，ShaoQ．，HeJ．，JiangB．W．，￡Ⅱ—97”“护[J】，2010，36：5179—5183． 【5】Yang