弱精子症患者精子蛋白地研究.pdfVIP

弱精子症患者精子蛋白的研究 李宏军于宁李汉忠北京协和医院泌尿外科 人类精子质量的逐年下降与男性不育症(Male Infertility)是严重影响现代男性健康和家庭幸 福的全球性医学难题和社会问题。世界范围内约有10％,15％的已婚夫妇遭遇生育困难，而且不 育夫妇的总发病率呈明显升高趋势。由于男性生殖能力异常所致的不育几近50％，北京协和医院 男科近四年来诊治的男性不育症患者人数累计高达万余例。 是引起男性生育力低下和不育症的最主要因素之一。病因复杂，治疗比较困难，尚无成熟方案， 是临床工作中一个相对棘手的难题。 辅助生殖技术(Al玎)解决了一部分患者的生育问题，但缺点是费用昂贵、成功率低，且具 有一定的将未知遗传性疾病基因传递给子代的风险。因此，对弱精子症的病因及其发病机制进行 基础研究仍十分必要，是探索自然妊娠的重要治疗途径。 蛋白质组学及其技术是目前最具有价值的生命科学研究手段之一，它是应用生物化学与分子 生物学方法对蛋白质进行高效和大规模分析的技术。能够从整体水平动态地反映蛋白质的表达情 况，筛选和寻找功能相关蛋白，并进行有效的调控。能够从宏观水平揭示弱精子症发生的分子表 象，探讨病因和发病机制，研究精子蛋白差异表达及其与不育症的相互关系。 一、研究方法 正常供精者精子蛋白30例、特发性弱精子症患者精子蛋白90例(轻度30例、中度30例、重 Analysis)，特异抗体杂交，比较目 密度值比较。蛋白质免疫印迹技术鉴定分析(Western．Blotting 的蛋白与内参的校正值，对凝胶上的可疑条带做进一步鉴定。 二、结果 病例选择：弱精子症患者：90例，年龄25-38岁，平均31．5岁，以青壮年为主，平均不育年 (a+b)级精子20％或a级精予7％。正常对照：30例，年龄24--一29岁，平均25．4岁。 样品的筛选和处理：每份标本的精液量、pH值、精子密度、精子活率、液化时问均符合世 界卫生组织(WHO)推荐的诊断标准，统计学处理后无组问差异。按照精子活动力分级将弱精子症 患者分为轻、中、重度三组，每组各30例。采用Percoll密度梯度离心法有效去除精浆中的白细胞、 圆形细胞和未成熟生精细胞等成份。 蛋白凝胶电泳80KDa条带光密度值及其所占总蛋白的百分比正常样品高于患者样品。 Western Blotting免疫印迹显示正常精子VASA蛋白含量显著高于患者样品。对比组之问的差别具 有显著性意义(P0．05)。图：略。 三、结论 本课题应用蛋白质组学技术开展了特发性弱精子症患者与正常供精者的精子差异表达蛋白的 比较研究。选择120例临床大样本，应用SDS凝胶电泳和WesternBlotting免疫印迹技术 213 鉴定了特异蛋白DDX4在正常精子中的含量显著高于病变样本且统计学差异显著，表明其在精子 发生以及精子正常生理功能的发挥过程中起到关键作用，它可以作为评估精子质量的高度特异性 生物标记物，并可能成为提高受精成功率和男性避孕药物新的作用靶点。 AFM对黄精赞育胶囊优选方处理前后 人弱精子超微结构的研究 陈斌北京市普仁医院泌尿男科 韩冬国家纳米科学中心纳米医学与生物学研究室 刘保兴北京大学第一医院男科中心 王琦北京中医药大学生殖医学研究中心 黄精赞育胶囊是由王琦教授研制的我国第一个治疗男性不育的中药新药…(国家新药证书 。经实验研究及临床应用表明【2J；该药能够提高精子活力、增加精子数量，全面改善精 子质量。王琦在黄精赞育胶囊原方的基础上，遵照原有“补肾益精，活血化瘀，清利湿热”的 治疗原则，依据大量临床经验，结合药理研究结果，针对男性不育的各个病理环节采用多种 同类药物选择1．2味代表性药物，或选取兼有多种功效药物，优化形成新的优选复方。动物 研究结果表明，优选方大、中剂量组治疗后，精子活力、活率、密度及运动速度较模型组显著提 高【3】。本研究应用原子力显微镜(AFM)技术对弱精症病人的