同抗灰斑病玉米品种接菌后保护酶同工酶图谱地变化研究初报.pdfVIP

同抗灰斑病玉米品种接菌后保护酶同工酶图谱的变化研究 初报 王桂清杜学林邢光耀 (聊城大学农学院植物保护系，聊城252059) 摘要：为了寻找简便有效的。铺种鉴定方法和为抗病育种奠定理论基础，采用电泳分离法分析了不同抗灰斑病玉米品种 化酶(SOD)的同上酶图谱变化。结果显示：接种后，同工酶谱带数量主要变化在中感和中抗品种；谱带颜色(强度) 抗性品种比感病品种加强的明显。因此，在筛选抗灰斑病的玉米品种时，可以把接种后保护酶同工酶谱带数量和强度 是否变化作为鉴别抗病品种的依据之一。 关键词：玉米；玉米灰斑病；保护酶：同工酶 玉米灰斑病(Carposporeszeae—maydis 种为害性很大的病害。重病地块叶片大部变黄枯焦，果穗卜垂，籽粒松脱干瘪，百粒重下降，严重影 响产量和品质。1991年该病首先在辽宁丹东、庄河等地突然大发生，现已成为东北三省玉米的重要病 害。近年山东省也局部发现此病，由于当前常用的骨干自交系大都是感病的，因而对灰斑也有潜在威 胁不可忽视。长期以来玉米病害的流行一直是影响我国玉米高产稳产的主要限制因素之一，大量实践 证明利用玉米的抗病性是防治病害最经济、最有效的方法。提高玉米的抗病性已经成为玉米研究的永 恒目标【l’21。传统筛选抗病玉米品种的方法单一，周期长且工作量大，由于病原菌致病性的差异，不 同环境下抗病效果也不同。为了筛选出最适于使用环境的抗病品种，亟待建立快速有效的品种鉴定方 法。为此，分析了不同抗性玉米品种接种前后保护酶同工酶图谱变化，旨在通过抗病品种的免疫表现， 为玉米抗病品种的筛选提供新的参照。 1材料与方法 1．1试验材料 品种均由聊城市汇德丰种子公司提供，编号和抗病性如表1。 囊1 10个玉米品种的杭霸性应编号 ■五93-1郧单958表大109LDg芑4莱柱14 LD981131-13707盒奄702东簟60 I．．19661 发席孳级4 4 3 3 3 2 2 l 05 0， 执孵性评价 尊 巷 中甚 中暮 中暮 中执 中执 执 嵩执 膏挽 晴升e龃 I 2 3 4 5 6 7 8 9 10 号处茸蛆 王 2 ： 皇 ￡ § 2 i 里 业 1．1．2供试病原茵玉米灰斑病菌病样2006年采自辽宁省沈阳市，经组织分离、单孢培养得到纯化菌株， 选用实验证明致病力较强的菌株06—09为供试菌株进行接种处理。菌株由聊城大学植物病理研究室提 供。 1．2试验方法 1．2．1接种与取样将在玉米叶煎汁固体培养基上生长7天的病菌，用无菌水配制成孢子悬液，孢子悬 液浓度为5x108个／ml。当玉米植株长到大喇叭口期，采用菌悬液灌芯法进行接种，每株5ml。当接种 40天后，植株发病明显时进行取样。取样时取发病部位，不同品种间取样部位一致，对照组的取样部 位与处理组一致。用蒸馏水洗净叶片，于．20℃冰箱保存备用。 0．2mol／L 1．2．2酶粗提液的制备准确称取1．02试样，放入预冷的研钵中，加入1．OmlpH7．0的磷酸缓 冲液，再加入适量石英砂，冰浴研磨成匀浆，转入离心管，并用5ml磷酸钠缓冲液冲洗研钵、研棒及 475 等的粗提取液，．20℃冰柜中保存。 1．2．3同工酶电泳参照胡能书(1985)介绍的方法制胶和进行非变性PAGE电泳分离，略加改动。分 离胶浓度为7．5％，浓缩胶浓度为3％。电泳在4。C冰箱中进行，每样品孔进样量为20山。浓缩胶内电 泳电流为12mA／板。进入分离胶后，电流调到25mA／板，当溴酚兰迁移到距胶底端lcm处，停止电泳， 取下凝胶，用水反复冲洗后进行染色。 电泳结束后，先用清水冲洗胶面，然后将凝胶放入显色液中染色照相，记录结果。 方法【6J；超氧化物歧化酶(SOD)，参照马文丽等(2004)方法【，