ARS_Al_与蛋白质作用的分光光度研究.pdfVIP

第21 卷, 第5 期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 1 , No . 5 2 0 0 4 年 9 月 Chinese Journal of Sp ectroscop y Laboratory September , 2 004 ARS-Al ( Ⅲ) 与蛋白质作用的分光光度研究 衷 明华¹ ( 韩山师范学院化学系　广东省潮州市　521041) 　　在 4. 0 的 - 缓冲溶液中, 茜素红 ( ) - ( Ⅲ) 牛血清白蛋白( ) 生成红色 pH Britton Robinson S A RS Al BSA 复合物, 吸收峰波长 K = 515nm, 比金属离子络合物本身红移80nm 。表观摩尔吸光系数E= 2. 04 ×105 m ax L ·mol- 1 ·cm- 1 。吸光度值在BSA 的质量浓度20—180mg ·L- 1范围内呈线性关系。所拟定的方法有较 好的灵敏度, 可以用于实际生物样品中蛋白质含量的测定。 茜素红S-铝( Ⅲ) , 蛋白质, 分光光度法。 : O657. 32: A : 1004-8138( 2004) 05-0849-03 1　前言 蛋白质是人体中一类重要的生物大分子, 其功能对于很多生命现象都是重要的。目前作为蛋白 [ 1, 2] 质探针的研究主要集中在有机小分子 如分析试剂上, 在适当的条件下它可 蛋白质通过非共价 键相结合形成一种超分子化合物。该化合物同染料本身相比在吸收光谱和光吸收程度上有着明显 的变化, 以此为基础建立了许多蛋白质光度分析的方法。最经典的是考马斯亮蓝( CBBG-250) 法, 国 内用分光光度法研究了许多染料和蛋白质相互作用的机理并用于分析测试, 取得了较好的结果。茜 [ 3] 素红 ( ) 是常用的有机染料, 迟燕华等 将它直接用于蛋白质的光谱探针, 考虑到 是铝 S ARS ARS 离子的灵敏指示剂, 我们尝试着用 - ( Ⅲ) 作为蛋白质的光谱探针。实验证明 - ( Ⅲ) 比 ARS Al ARS Al ARS 更灵敏。 2　实验部分 2. 1 7200 型可见分光光度计( 上海尤尼柯仪器有限公司) 。 溶液: 1 ×10- 3 / ; ( Ⅲ) 溶液: 0. 1 / ; 牛血清白蛋白( , 华美生物工程公 ARS mol L Al mg m L BSA 司) ; 人血清白蛋白( HSA, 武汉瑞德生物制品有限公司) ; 上述试剂均配成0. 5mg/ mL 的浓度并在 [ 4] 4℃保存。Britton-Robinson( B-R) pH 1. 81—6. 09 的系列缓冲溶液 。 2. 2 在一系列25mL 容量瓶中依次加入 5. 0mL ARS 溶液、3m L pH = 4. 0 的B-R 缓冲溶液、 1. 25mL Al( Ⅲ) 溶液, 摇匀, 根据实验内容要求, 加入不同量的