精品范文血浆氨基酸代谢谱与糖尿病相关性研究.pdfVIP

分析化学(FENXI 第5期 第38卷 HUAXuE)研究简报 Chinese of 697～701 Joumal 2010年5月 AnalyticalChemistry DOI：lO．3724／SP．J．1096．20lO．供珩97 血浆氨基酸代谢谱与糖尿病相关性研究 韩晓菲1 黄宇虹2 王龙星1 杨乾栩1 肖红斌“ 张德芹2 1(中国科学院大连化学物理研究所，大连116023)2(天津中医药大学，天津300193) 摘要为了利用代谢组学手段研究血浆氨基酸代谢谱与糖尿病相关性，采用邻苯二甲醛(0PA)柱前在线 衍生反相高效液相色谱法，建立了血浆中21种氨基酸代谢谱的相对定量分析方法。衍生由自动进样器在线 自动完成，紫外检测器检测，流动相A为lO姗oL／L 7．95)，B为乙腈一甲醇-水 Na2HP0。一Na2B。07缓冲液(pH (45：45：10，∥y)，线性梯度洗脱，流动相B在30rIlin内由5％增加至46％，27min内21种氨基酸全部得到良 好分离。用此方法测定了5l位临床糖尿病人血浆氨基酸代谢谱。以相对峰面积作为原始数据，按血糖值高 低预分组，通过spss和Matlab软件平台，用线性判别分析、逐步判别分析和得分图进行关联研究，结果表明： 血浆中氨基酸代谢谱与血糖值的高低存在相关性，对血糖值低于6．2的志愿者和血糖值高于9．5的志愿者， 1砷)承载了上述分组的重要信息。其对上述分组的判别分析总正判率为90．2％，可作为反映血糖值高低变 化的标志物组，对于糖尿病的早期诊断及深入研究具有潜在的科研及临床价值。 关键词氨基酸；高效液相色谱；代谢组学；糖尿病 1 引 言 o等方面发挥着越来越重要的作用。与生 代谢组学作为系统生物学一个新的分支，在疾病诊断¨2 物有机体代谢活动密切相关的代谢产物主要包括：糖类、脂质类、脂肪酸类、核苷类、蛋白质类、氨基酸类 等。许国旺等通过代谢靶标分析，以尿中13～15种核苷类浓度为数据矢量，用主成分分析(PCA)法处 理数据，对癌症病人和正常人进行分类研究，识别率达72％【3．4J。Yi等通过对糖尿病患者血浆中脂肪酸 轮廓分析，用偏最小二乘一线性判别分析(PLs—LDA)模型进行了糖尿病患者和健康人的模式识别，得到了 有价值的生物标记物信息L5J。目前，对氨基酸类代谢谱的代谢组学研究及其与疾病间的相关分析很少。 糖尿病是一种典型代谢类疾病，其多种并发症是影响患者生活质量的重要因素，对糖尿病早期及超 早期发现与预防尤为重要。用代谢组学方法，寻找糖尿病代谢标记物并进行早期分类诊断，已成为糖尿 病研究的重要方向∞J。氨基酸作为代谢网络中重要的代谢物，与糖尿病存在相关性。本实验通过氨基 酸类代谢谱的代谢组学法其与糖尿病的相关性，建立了血浆氨基酸代谢谱柱前在线衍生化HPLc—uV 方法，测定了5l位志愿者血浆样本，结合多变量统计分析方法，对以血糖值为预分组指标的分类情况进 行了关联分析。结果表明，血浆中20种氨基酸代谢谱与血糖值的高低有很强的相关性，其中有7种氨 基酸对血糖值高低分组贡献率最大。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 2009J09-28收稿；2009一12_02接受 本文系围家自然科学基金(N0资助项目 ·E-mail：hbxi∞@dicp．舵．cn 万方数据 分析化学 第38卷 色谱纯；Milli-Q超低有机物超纯水机(美国Millipore公司)制备的超纯水。 2．2样品采集与预处理 51份血浆样本取自天津中医药大学附属医院，血浆样本采集后，立即冷冻保存于一78℃冰箱中。 B．S6．2的样本25例，B．S9．5的样本26例。样