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奶牛繁殖技术进展 人工授精技术极大地提高了优良公畜的利用率,而胚胎移植和胚胎分割技术则是充分挖掘优良母畜繁殖潜能的有效途径。胚胎移植技术包括了供体超数排卵，人工授精，胚胎采集，同期发情，移植受体。使其优良母畜的繁殖潜力充分发挥，迅速增加其后代数量，可提高母畜繁殖率几十倍。加速遗传进展，较现行的育种方案提高50%～100%。也为MOET育种提供有价值的技术资料。动物胚胎移植技术是胚胎工程的重要组成部分。动物胚胎移植技术于19世纪末在英国首先试验成功，以后在许多种动物上相继获得成功 。兔（1891年）；大鼠（1933年）；绵羊（1934年）；山羊（自身移植）（1934年）；小鼠（1942年）；奶牛（非手术移植）（1964年）：雪貂（1968年）；小鼠（冷冻胚胎移植（1972年）；牛（冻胚移植）1973年）；马（1974年）；狒狒（1976年）；猪（1978年）；狗（1979年）；猪（冻胚移植）（1989）。胚胎移植技术历经了100多年的发展过程，但发展最快的是近30年。自1970年以来，随着胚胎培养技术和移植技术的不断提高，哺乳动物胚胎分割技术也取得了突破性进展。小鼠二分2细胞胚（1970年）获得同卵双生后代。绵羊胚胎分割（1974年）获得同卵双生羔羊。移植技术也由从实施外科手术采集和移植胚胎（牛马等大家畜），转向非手术胚胎的采集和移植，简化了胚胎采集和移植程序，推动了胚胎移植技术的实用化。1 胚胎移植技术研究　　动物的胚胎移植技术，目前已基本成为一项成熟的生物工程技术。其主要步骤包括：供体动物的超数排卵，人工授精，胚胎采集，受体母畜的同期发情处理，胚胎移植或胚胎保存等重要技术环节。1.1 超数排卵是指在母畜发情周期的适当时间，注射外源促性腺激素，使卵巢中比在自然情况下，有较多的卵泡发育并排卵的一项技术。目前超数排卵处理常用激素有FSH、LH、PMSG、hCG和PGF2α 及类似物。用量一般按动物体重大小而依次降低。但在牛和绵羊上有所不同。据报道，500～600mg体重的黑白花母牛超数排卵所用的FSH、LH为300IU(7.5mg)和80IU，36头母牛平均采胚数8.4枚，可用胚胎数7.14枚和40头母牛平均采胚数6.73枚，可用胚胎数6.1枚的成绩。另据报道，50kg体重的绵羊使用FSH、LH为300IU（7.5mg）和50IU，42只母羊，平均采胚数8.48枚，可用胚胎数7.29枚的成绩。激素在牛羊体内的含量与超数排卵的关系尚待进一步研究。 FSH激素的注射方法一般常用连续3d递减注射法，每天2次，间隔8～12h，后期加注1次PGF2α 和LH便可获得较好的排卵效果。也有用大分子聚乙烯吡咯烷酮（PVP）加FSH300IU（7.5mg）一次注射，并获得成功的报道。1.2 人工授精　　动物一般在停药后24～48h内有95%的母畜均表现发情。于当日上、下午各人工授精1次，因母畜为超排处理，有多个卵子排出，而需加大输精量，用原精的0.2ml（含4亿精子）/次，直到发情结束。1.3 胚胎采集和鉴别　　目前在大家畜牛、马等常用非手术采集胚，用专用的二通或三通硅胶管制品，前端有一气囊，冲气后阻止冲胚液流出。冲胚液大多用杜氏磷酸缓冲液（PBS）加5%～10%牛血清白蛋白（BSA）也有加TCM─199的组织培养液，若操作正确，熟练，回收率可达80%以上。　　绵羊、山羊一般多用手术采胚法，将母羊固定于手术床上（仰腹），前低后高约成45°。术前皮下注射0.15ml静柱灵或“846”进行全身麻醉，一侧鼠蹊部剪毛、清洗、消毒、切2.5cm小口，另一侧打入腹腔内窥镜检查排卵情况。借助内窥镜用子宫专用钳将其拉出，肠管钳夹住两头，大头进液，小头出胚，每侧子宫注入25ml PBS液冲二盘，立刻检胚，体视显微镜下检胚时，对胚胎进行鉴别分级。一般可将胚胎分为四级，A级胚胎发育完好，B级胚胎发育尚好，C级胚胎发育一般但可用，D级胚胎发育停止或退化。回收率可达85%以上，当然这种胚胎分级方法在生产上有较好的实用性。如要进一步研究，除此之外，还要进行短期培养观察，有荧光物质代谢法、死细胞荧光法和代谢测定法。1.4 同期发情是指利用某些外源激素，人为控制并调整一群母畜发情周期的过程，使之在预定的时间内，集中发情，以便有计划地合理组织胚胎移植所进行的同期化处理方法。也称同步发情。常用的激素药物有PMSG、GnRH及合成类似物LHRHA1-A3、FSH、LH、hCG、PGF2α 及类似物，孕激素等。在牛上常用二次PGF2α，一般在注射后36～48h，有85%母牛均表现发情。绵羊常用孕激素阴道海绵栓法，放置14d后取出，并肌注2ml/只PMSG，48h同期率可达98%（n=240）。也有用孕酮（人用保胎药），连续注射12d，停药时肌注一次PMSG2ml/