实验三微生物培养基的配制和灭菌.docVIP

微生物实验三— 微生物培养基的配制和灭菌 一、目的要求 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 二、实验材料 药品： 牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O等。 仪器：高压蒸汽灭菌锅、天平、牛角匙、电炉、pH试纸、量筒、烧杯、漏斗、漏斗架、玻棒、三角瓶、带棉塞的无菌试管、吸管、报纸、绳索、棉花、标签等。 三、 实验原理 培养基是按照微生物生长发育的需要，用不同组分的营养物质调制而成的营养基质。人工制备培养基的目的，在于给微生物创造一个良好的营养条件。把一定的培养基放入一定的器皿中，就提供了人工繁殖微生物的环境和场所。自然界中，微生物种类繁多，由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究上的目的不同，所以培养基在组成原料上也各有差异。 1.按组成成分可分为: 合成培养基、半合成培养基、天然培养基 2.从培养基的物理状态可分为： 液体培养基：不加凝固剂 固体培养基：加入2%左右的凝固剂 半固体培养基：加入0.2—0.5%凝固剂 3.按用途分： 基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基:用于分离和培养细菌的基础培养基，又称天然培养基。 配方如下： 牛肉膏 3 g 蛋白胨 10 g 氯化钠 5 g 琼脂 20 g 自来水 1000 mL pH 7.2~7.4 淀粉琼脂培养基（高氏一号），用于分离和培养放线菌，是一种合成培养基。 配方如下： 可溶性淀粉 20.0 g KNO3 1.0 g K2HPO4 0.5 g MgSO4? 7H2O 0.5 g NaCl 0.5 g FeSO4? 7H2O 0.01 g 琼脂 20 g 自来水