荡石片质量标准的研究_医学论文.docVIP

荡石片质量标准的研究_医学论文 荡石片质量标准的研究_医学论文 作者：郭建功　高超旭　周毅擎　张东彬 　　论文关键词：荡石片　质量标准　薄层色谱法　高效液相色谱法 　　论文摘要目的：研究与修订荡石片的质量标准。方法：采用TLC方法对荡石片中的茯苓、甘草进行定性鉴别；应用HPLC法，选用HypersilC18色谱柱（4.6×200mm,5μm），乙腈－0.5%磷酸(11∶89)为流动相，检测波长326nm，流速1.0ml/min，对荡石片中的绿原酸进行含量测定。结果：茯苓、甘草的TLC鉴别方法专属性强，操作简便。HPLC含量测定，绿原酸进样浓度在5.05～40.40μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系（r＝0.99999，n=5）；绿原酸的回收率为99.28％，RSD=1.16％。结论：本方法可对荡石片的主要药味进行准确的定性和定量测定，能更为有效的控制荡石片的质量。 　　荡石片是由苘麻子、蛤壳、玄明粉、石韦、茯苓、牛膝、海浮石、小蓟、甘草等九味药材制成的中药成方制剂，具有清热利水，通淋石功能。用于肾结石，输尿管、膀胱等泌尿系统结石。为控制产品内在质量，对方中药味茯苓、甘草进行了薄层色谱鉴别。方中石韦功效为利尿，泄热，清肺。用于小便不利，尿路感染，急性肾炎浮肿等，为方中主药。石韦与另一味中药小蓟均含有绿原酸成分，故我们选择用高效液相色谱法测定石韦和小蓟中绿原酸作为本品的质控指标。关于绿原酸的测定，目前已有大量的高效液相色谱法的报道[1]～[5]，该方法具有操作简便，准确，检测灵敏等优点。本文建立了HPLC法测定荡石片中绿原酸含量的方法。 　　1　仪器与试药 　　高效液相色谱仪：Agilent1100高效液相色谱仪 　　试验用荡石片样品由郑州市高新区意康药物研究所提供；绿原酸对照品（批号110753-200212，中国药品生物制品检定所提供，含量测定用）；茯苓药材对照品（中国药品生物制品检定所，批号121117-200504）；甘草对照药材（中国药品生物制品检定所，批号120904-200511）； 　　乙腈为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。 　　2　TLC鉴别 　　2.1茯苓的TLC鉴别取本品20片，除去薄膜衣，研细，加乙醚50ml,加热回流提取1小时，滤过，放冷，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材2g,同法制成对照药材溶液。取缺茯苓阴性样品，同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－丙酮－乙酸乙酯(85∶15∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上不显相同颜色的荧光斑点（见图1）。 12345 图1茯苓的薄层色谱鉴别 1.1号样品2.2号样品3.3号样品4.茯苓对照药材5.缺茯苓阴性样品 　　2.2甘草的TLC鉴别取本品30片，除去薄膜衣，研细，加乙醇30ml,加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，加乙醇20ml,加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。取缺甘草阴性样品，同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取对照品溶液2μl、供试品溶液和阴性对照溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－甲醇－水(40∶10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上不显相同颜色的斑点（见图2）。 12345 图2甘草的薄层色谱鉴别 1.1号样品2.2号样品3.3号样品4.甘草对照药材5.缺甘草阴性样品 　　3含量测定 　　3.1色谱条件HypersilC18色谱柱（4.6×200mm,5μm）；乙腈－0.5%磷酸(11∶89)为流动相；流速1.0ml/min，检测波长为326nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000。 　　上述色谱条件参照《中国药典》2010年版一部第83页石韦项下【含量测定】项下方法拟订，在上述条件下，绿原酸峰与相邻色谱峰可获得基线分离，分离度大于1.5。 　　3.2溶液的制备 　　3.2.1对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品5.05mg，置25ml棕色量瓶中，加50％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取1ml，置10ml棕色量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，即得（每1ml含绿原酸20.