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第 卷 分析化学 （ ） 评述与进展 第 期 30 FENXI HUAXUE 2 年 月 2002 2 Chinese JOurnal Of Analytical Chemistry 237 ~ 241 纳米粒子在生物分析中的应用 ， 1 1 2 2 1 林章碧 苏星光 张家骅 金钦汉! 1 （长春分析仪器研究和技术开发中心，吉林大学化学系，长春 130023） 2 （中国科学院激发态物理开放实验室，长春 130021） 摘 要 纳米粒子探针与传统的有机染料相比有更好的光谱特性和光化学稳定性。本文介绍了3 种类型的 纳米粒子在生物分析中的应用，并评价了其作为生物荧光探针的发展前景。 关键词 纳米粒子，量子点，生物荧光探针，评述 ! 引 言 生命科学的飞速发展对分析化学提出了大量新的课题，目前集中在多肽、蛋白质、核酸等生物大分 子分析，生物药物分析，超痕量、超微量生物活性物质分析，甚至微生物分析等。因此，生物化学分析已 ［］ 1 成为现代分析化学发展的最重要的前沿领域之一 。为了适应这种形势的要求，众多分析化学工作者 正在不断努力开创着新的方法和技术。纳米粒子的应用就是其中的一个重要代表。 在生物医学及生命科学中应用最多的是分子光谱分析方法。其中由于荧光光谱的灵敏度高、选择 性好，因此对分子荧光方面的研究更是十分活跃。荧光分析法常用于临床测定生物样品中某些成分的 含量，其中以核糖核酸（ ）和脱氧核糖核酸（ ）的测定更为重要。但若直接用荧光光谱法对它们 RNA DNA 进行研究时，碱基和核酸的荧光量子产率很低，而且在20 多种氨基酸中，只有色氨酸、酪氨酸和苯丙氨 ［］ 酸有天然荧光。因此检测它们的最好方法还是利用各种荧光探针2 。 由于生物体系的特殊性和复杂性，为了能测定更多的生物活性物质，对激光激发生物荧光探针有很 ［］ 高的要求3 ：它们应当具有较好的光稳定性，不易被光解或漂白；对生物体本身功能的影响要小；要有良 好的激发和荧光效率；对所测量的生物活性反应敏感；光谱特征突出等等。目前常用的标记物为放射性 ［，］ 1 2 同位素、酶或底物、化学或生物发光体系和荧光物质 。然而放射性同位素的使用带来了污物处理的 难题，不仅有可能损害操作人员的健康，而且寿命较短，难以获得长期稳定的检测标准；酶免疫分析法虽 克服了放射性污染的弊病，但酶本身容易失活；化学发光和生物发光分析法的灵敏度很高，但其影响因 素多，稳定性差，瞬间的化学反应后样品的发光无法再现，结果的重现性差；虽然用荧光分子克服了以上 缺点，但是它们对测定的光学系统有严格的要求。目前，应用最为普遍的荧光探针是有机染料，在大多 数情况下，由于它们的激发光谱都较窄，所以很难同时激发多种组分，而其荧光特征谱又较宽，并且分布 不对称（见图1a），这又给区分不同探针分子的荧光带来困难，因此要同时检测多种组分较为困难。有 机染料最严重的缺陷还是光化学稳定性差，光漂白与光解使每个染料探针能够发出的荧光光子平均数 量不可能太多，光解产物又往往会对生物体产生杀伤作用。利用纳米粒子作为生物荧光探针就能较好 的解决这些问题。与传统的荧光探针相比，纳米晶体的激发光谱宽，且连续分布