TRID在大肠癌组织中表达的研究与其反义表达载体的构建.pdfVIP

下载本文档

0
0
约5.02千字
约 4页
2017-08-17 发布于安徽
举报
版权申诉

TRID在大肠癌组织中表达的研究与其反义表达载体的构建.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

中国癌症研究进展@ TRID在大肠癌组织中表达的研究及其反义表达载体的构建刘君伟曾江郑树凋亡是一种基因控制的细胞自主性死亡过程，是维持体内环境稳定的重要机制之一。诱发凋亡的因素多种多样，近期发现的一个蛋白TRAlL(TNF-rehtedinducing apoptosis ligand) 是TNF家族中有一个能诱发细胞凋亡的因子It]。在后来的研究中又相继发现了它的受体： withoutaniatraceUular DR4，DR5和TRID(TRAIL receptor 法检测了11例大肠癌患者的癌组织与邻近正常组织中TRID的表达情况。材料与方法 1．组织总RNA提取实验中所用正常大肠组织和大肠癌组织均来自浙江大学附属第二医院手术标本。所用方法按产品说明书进行。 mmol／L 件：模板RNA，5×RT缓冲液，RN舡in，10dNTP，下游引物及AMV逆转录酶 malol／L mmol／L MgCl2，10 增产物进行电泳。并用mIAGINGISl000图像分析系统进行分析。 ’ 肝组织中提取。 4．连接反应及转化L41 将TRID的来自人胚胎肝组织的RT-PCR产物与pGEMT-easy 上进行蓝白克隆筛选。 5．克隆鉴定L61挑取平板上的白色克隆，进行扩菌，提取质粒，并用EcoRI(Gil)001)酶切和序列分析鉴定所克隆的片段。 I酶切 6．构建TRID反义表迭戢体并鉴定【4】将pGEMT-easy-TRID重组质粒的EcoR 产物(TRID)和pc_DNA3，1(一)载体(invitrogen)的EcoR Kit 行连接反应。把连接产物转化DHSa感受态大肠杆菌后，在台氨苄的平板上进行蓝白克隆筛作者单位：310009杭州，浙江大学肿瘤研究所 TRID在大肠癌组织中表达盼研究爰其反义表达载体的构建 199 所克隆片段的方向。结果约是18S的2倍，提示RNA完整，未发生明显降解。结果如图1。经IMAGING 大肠癌组织中均有表达。围1 RT．PCR组织RNA产物 intestine M：PCRmark口；N：mmmd1ag tw,sue；T：捌cane8 衰1太肠癌与正常大肠粘膜组织中TRIDmRNA的linage检测值编号NIRlD佃。血 1硇妯 1 0．38 0．36 2 0．27 0，26 3 0．39 1．07 4 0．40 0．63 5 0．30 2．02 6 2．58 5．11 7 O．19 020