还脑益聪方对早期认知功能障碍大鼠血浆P-选择素、PAI-1和血液流变学与影响.pdfVIP

还脑益聪方对早期认知功能障碍大鼠血浆P一选择素、 PAI．1和血液流变学的影响 姚明江刘剑刚李浩赵文明 中国中医科学院西苑医院北京100091 认知功能障碍(cognitiveimpairment，也称认知功能衰退、认知功能缺损或认知残疾)泛指由 各种原因(从生理性老化到意识障碍)导致的不同程度的认知功能损害的临床综合征，轻者如轻 度认知功能障碍，重者如各种类型痴呆等。随着我国逐渐进入老龄化社会，其患病率逐年增加， 已经成为一个重要的公共健康问题。近年来，多项研究分析表明，心脑血管病危险因素与认知功 能障碍相关。血液流变学异常是许多疾病的始动因素或病理环节，可引起机体功能或行为障碍， 对疾病的发生和发展具有重要意义．有研究表明，高黏滞血症是痴呆患者的危险因素之一。前期 研究表明，老年轻度认知功能障碍与脂质代谢有一定相关性，而还脑益聪胶囊可改善老年轻度认 知功能障碍患者的记忆功能及血脂水平。本实验以D-半乳糖配合高脂饲料造成衰老模型致认知功 能障碍大鼠，观察还脑益聪方早期干预，对血浆P．选择素、PAl-l含量及血液流变性异常的影响， 并探讨还脑益聪方的作用机制。 材料和方法 北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号SCXK(京)2007—0001。 2主要试剂及药物P．选择素(P-selectin)试剂盒由美国RD System公司提供(批号； EIA05990)；血浆纤溶酶原激活物抑制剂伊AI．1)试剂盒由上海太阳生物技术公司提供(批号： 421 5％蛋黄粉，89．5％基础饲料)由北京科澳协力饲料有限公司提供：还脑益聪方由何首乌、人参、 石菖蒲、黄连、葫芦巴、川芎等组成，按处方比例称取中药饮片，委托中国中医科学院西苑医院 制剂室加工浓缩膏剂；盐酸多奈哌齐片(商品名：安理申)由卫材(中国)药业有限公司提供(5rag／ 片，批号：060609A)。 3实验造模与动物分组将实验动物每日于颈背部皮下注射D一半乳糖50mg／kg体重，同时给 与半高脂饲料喂食，空白组大鼠每日于颈背部皮下注射等量生理盐水并饲喂普通饲料，连续6w。 第6w周末行Morris水迷宫试验，将行为学异常(和空白组比较)的48只大鼠随机分为4组，每 组12只，分别为还脑益聪方大剂量组(简称中药高组)：149生药kg,还脑益聪方小剂量组(简 称中药低组)：79生药／蚝；阳性药对照组(简称阳性组)：盐酸多奈哌齐片，0．4mg／kg；模型对 照组(简称模型组)：等量水。另设空白对照组(简称空白组)：等量水。将以上药物配制成相 一306— 应的混悬液，备用。第7w开始。连续灌胃4w，空白组、模型组每日灌服等量水，1次／d。除空 白组外，其余各组饲料饲喂方法为普通基础饲料喂养4w后，再予高脂饲料喂养至第10w末。 2．3行为学测试于第10w末行Morris水迷宫试验，由定位航行试验与空间探索试验两部分 组成。定位航行试验：实验水深30cm，水温254-I℃，将大鼠从第二象限标记处逐一放入水池中， 放入时将大鼠面向池壁，自动录像系统记录大鼠从入水至找到平台并爬上平台所需的时问(以四 肢爬上平台为准)，即逃避潜伏期(PlatformLocaling 台，则由实验者将其引导至平台。潜伏期最长时间为180s。待大鼠爬上平台并在平台上休息10s 后，再进行下一只大鼠的试验。每天进行1次，连续训练5天。记录每天的潜伏期以及第5d从放 入水中至找到平台所经过的总路程。空间探索试验：第5d下午。撤除平台，随机选取一点，面向 池壁将大鼠放入水池中，摄像系统自动记录大鼠3rain内进出原平台区的次数作为评价大鼠学习成 绩的指标。 2．4P．选择素及PAl．1指标测定全部大鼠行为学测试后，禁食12小时．10％水合氯醛腹腔麻 醉后剪开腹腔，穿刺腹主动脉取血，全血2％EDTANa2抗凝，分离血浆，待指标检测。取血过程 中，因操作不善，导致5组中分别有某一项指标血样不够。血浆P．选择素及PAl-1含量测定采用 酶联免疫法(ELISA)，试验步骤严格按照试剂盒说明书进行。 s-。、120．0