SKE法在ATP生物发光快速检测中的应用.pdfVIP

江西农业学报2蝴，19(5)：121—122 Acta A加cult眦eJi蛐祭i S髓法在A四生物发光快速检测中的应用 朱海华，王燕，伍季+，吕微 (河南省食品质量安全控制工程技术研究中心，河南郑州450002) 的SKE法和TCA法进行对比，得出采用0．2m彬L 理的最佳条件。 关键词：生物发光；A1甲；A1：P提取；快速检测；食品微生物 中图分类号：Q939．9文献标识码：A文章编号：1001—858l(200r7)05一012l一吆 SKEMethodiIl forA1PBiolulnine∞ence AppK∞ti叩of RapidⅨ慨矗on ZHUHai—hua，WANGY锄。WUJi’．LUWei c∞ter0fF00d (}Ie咖EIlgineeriIlg＆糯archQuality蚰ds如ty conhd，办即gzh叫450002，Clli聃) 8毗蛆dc伽．tentofA1’P timeofA，【Pwe弛studiedto Abst髓d：The戗perim叽tal‰to墙8uch鹪tllebu丑；er。敛砸Ictinz optiIni∞ extracti蚰c∞ditionsin witlltheTCA e】【tracd∞oonditi∞slbrIbods锄ple8wereto S跹metl州．Then㈣paredmet}10d．theo叫mal lmin 甑tmct inthebu自fer0fO．2nIoⅣLTis—Ac． 1【ey words：BioluIIlirl船cent；Aden∞i鹏triph0Bpllale(ATP)；A1Pex协把ti∞；R丑西ddetecti∞；F捌micm哑芦Ili锄 A，IP生物发光法通过检测A皿含量来快速判断食氯乙酸(TCA，分析纯)，嘶s一乙酸，％s一盐酸。 品样品中微生物的总体水平，和传统方法相比，具有更快 2实验方法 速、更方便、更灵敏的优点¨一-。因此，在快速检测方面具 采用膜过滤法，孔径为0．45um的无菌微孔滤膜对 有很强的优势和前景，国内外在这方面的研究报道也较 样品进行过滤，富集样品中的细菌，取滤膜备用。 多，但是在食品检测领域却没有得到实际广泛的应用心1。 2．1 SKE法的优化 其主要原因在于对这一技术的食品前处理方法缺乏具体 2．1．1A1P缓冲液的筛选将带菌滤膜放入1mL册 的研究。食品中的菌落总数含量水平一般比较低，如果 没有合适的细菌A皿提取方法伸1，会导致检测结果不准 确、不稳定，从而影响了ArIP生物发光技术在食品微生取60s。取100曲做发光检测，记录数据见图l。 物快速检测分析领域中的应用和发展。 细菌A皿的提取方法很多，主要有：加热法、超声波 8000 ￡、7000 法、有机溶剂法等提取方法。其中，有机溶剂TCA法对 06000 细菌ATP有较高的提取效率，价格低廉，国内应用得较 毒5000 墨4000 多。sKE法是本实验根据A，IP生物发光法检测食品微划3000 生物的实际要求，筛选出自制的细菌册提取剂 芟2000 荽1000 (sKE)，来提取细菌A仰的方法。本实验通过对A仲缓 O 冲液和A1P提取时间进行筛选，优化了