乙草胺降解菌筛选及其初步鉴定.pdfVIP

中国土壤与肥料2013(6) 1838／sfsc doi：10．1 乙草胺降解菌筛选及其初步鉴定 周建娇，邹芳，杨汉，徐晶，孙建光4 (中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，北京 100081) 摘要：乙草胺是农业生产中用量较大的除草剂之一，长期频繁大量使用在农田土壤和水体中形成积累，影响到 土壤肥力和环境生态安全。筛选到乙草胺降解菌36株，实验室纯培养条件下，72h对初始浓度50mg／L乙草胺的 降解达到0．43％～37．98％。16SrDNA基因分析比对结果显示，筛选到的34株降解菌在系统发育地位上分别属于 203—08和204—05与已知菌株16SrDNA最大相似性低于97％，系统发育地位尚不确定。 关键词：乙草胺；生物降解；菌株筛选；系统发育 中图分类号：S154．3 文献标识码：A 文章编号：1673—6257(2013)06—0093—04 乙草胺(acetochlor)化学名称2一乙基一6甲定和基于16SrDNA序列的初步鉴定，目的是为乙 基一N一乙氧基甲基一仅一氯代乙酰苯胺，是内吸 草胺污染农田的生物修复提供菌种资源和理论 性酰胺类除草剂，能够抑制杂草蛋白质合成，主要 依据。 用于防除大豆、花生、玉米、棉花等作物芽前一年 1材料与方法 生禾本科杂草和部分阔叶杂草llj。在土壤中持效期 可达2个月左右，一次施药可控制作物整个生育期 1．1样品与试剂 无杂草危害旧J。乙草胺半衰期较短，一直被认为是 筛选乙草胺降解菌土壤样品5份，2012年4月 一种低毒的环境友好型农药，但近年来频繁、过量 分别采自北京市小汤山、房山及北京市农林科学院 或使用不当，对农田土壤和地下水等造成了不同程 试验地玉米和小麦根际。 度的污染，影响了农田土壤的生物区系结构和土壤 乙草胺纯度96．8％。 酶活性旧J。生物降解是消除环境中乙草胺的主要途 1．2培养基 径，有针对性地筛选高效降解菌株，加速土壤残留 除草剂的降解，减少农田除草剂残留药害是一项十 (NH4)2S042，MgS04·7H200．1，MnS040．05， FeSO。0．05，CaCl0．003，乙草胺(按照试验设 分必要的工作。国内已有一些关于乙草胺降解菌的 2 计)，pH值7．0。 报道，董滨H1等分离到粘着剑菌属A一3(Ens治r adhaerens)，对10 无机盐培养基∞1(∥L)：NH。C11．0，KH：P04 mg／L乙草胺的降解率为33．6％； 0．5，KznP041．5，MgS040．2，NaCl 倪俊bo等分离到申氏杆菌Y一4(Shinellasp．)，对 0．5，pH值7．0。 50mg／L乙草胺的降解率为83．3％。国外对乙草胺 牛肉蛋白胨培养基。刊(g／L)：蛋白胨10．0，牛 肉膏5．0，NaCl 降解微生物的研究报道则相对较少。 5．0，pH值7．2。 本文从常年使用除草剂的小麦和玉米地采集到 1．3乙草胺降解菌的富集、分离、纯化 富集液乙草胺浓度300mg／L，加土样5 5个土壤样品，经过大量的富集、筛选工作，分离 g， 28℃、200 到36株乙草胺降解菌株，对其进行了